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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 库存:
18
- 英文名:
禽源性成分检测试剂盒(TaqMan qPCR荧光法)
- 保质期:
1年
- 保存条件:
-20
- 规格:
100T
禽源性成分检测试剂盒(TaqMan qPCR荧光法)
| 肉类是市场消费占比最大的食品之一,然而掺假现象时有发生,这不仅对消费者的经济利益造成损失,甚至影响人类身体的健康,因此对肉类掺假进行检测鉴别显得尤为重要。本禽源性成分检测试剂盒是基于TaqMan qPCR法,选取禽类(鸡/鸭/鹅)特异性基因作为检测目标,应用不同标记的TaqMan 探针,在同一管内对目标基因和内参基因采用双通道检测。其中内参的检测可以监控反应是否正常进行,防止假阴性结果。本试剂盒适用于畜肉、肉质食品、化妆品和饲料等样品中禽源性(鸡 /鸭/鹅)成分的鉴定 。 | ||||||||||||
组份 |
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适用样品 |
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| 畜肉、肉质食品、化妆品和饲料 | ||||||||||||
储存 |
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| 1. Lyophilized TaqMan PCR Reagent、Avian TaqMan PCR Assay和阳性标准品为干粉形式,在未溶解前,该制品可-20℃长期保存,并可室温运输,性能无下降。溶解后,可立即使用,剩余试剂可在-20℃保存1个月,在-60℃以下长期保存。 2. TaqMan qPCR Buffer于-20℃可长期保存。 |
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实例 |
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| 1.典型的禽源性阴性样品扩增图片 | ||||||||||||
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| 2、典型的禽源性阳性样品扩增图片 | ||||||||||||
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| 3、典型的扩增失败样品(需要重新制备DNA) | ||||||||||||
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文献和实验荧光定量 PCR 的常见异常结果除了扩增曲线异常、融解曲线异常两类常见情况外,qPCR 实验中通常还会遇到以下三大类情况: 1. 复孔间重复性差怎么办? 复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的 CT 值差异较大。 解决方法:如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的 △CT 值为 3 or 5 以上,那 CT 值为准确的,可多设置
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
为大家介绍qPCR引物设计的相关原则,并详细讲解靶基因序列检索以及常用引物设计软件,最后和大家分享qPCR引物实验验证,更多干货与你分享!
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