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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media plus Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
盒
中文名:Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media plus Kit
英文名:Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media plus Kit
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:见包装
产品简介产品编号:YM1010(序号1-6),YM1011(序号1-7)
储存温度:序号1-6 常温保存;序号7需-20℃储存,蓝冰运输
产品组成:(0.5 L/pouch)
产品说明:
Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media Kit(酵母单杂培养基套装试剂盒YM1010),含有用于Y187-pHis2系统酵母单杂交文库筛选的全套培养基。整套销售,性价比更高。培养基以非常方便使用的铝箔袋形式包装,每个独立包装可以配制0.5 L的培养基。使用时仅需要将袋中的所有干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加入0.5 L的ddH2O,然后121 ℃灭菌15分钟即可。无需称量和调整pH值。
Y187-pHis2 Yeast One-Hybrid Media plus Kit (YM1011)在试剂盒YM1010基础上增加了100 ml 3-AT溶液(2.5M,过滤除菌)。
使用方法:
Rich Liquid Media (Broth)
1. 序号1产品YPDA每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加0.5 L的去离子水中溶解。
2. 无调整pH值。121℃高压灭菌十五分钟。
3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基备用。
Rich Plating Media with Agar
1.序号2产品YPDA with Agar每袋干粉倒入三角瓶中,加0.5 L的去离子水中溶解(琼脂高压灭菌后溶解)。
2. 无调整pH值。121℃高压灭菌15分钟。
3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱备用。
Minimal Liquid Media
1. 序号3产品,每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中,加0.5 L的去离子水,搅拌溶解。
2. 无调整pH值。121℃高压灭菌15分钟。
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
Minimal Plating Media with Agar
1. 序号4、5、6产品,每袋干粉倒入三角瓶中,加0.5 L的去离子水,搅拌溶解(琼脂高温灭菌后溶解)。
2. 无调整pH值。121℃高压灭菌15分钟。
3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
3-AT的使用方法:
HIS3作为报告基因时,会有一定程度的泄漏性表达,出现背景过高的现象,一般称作自激活。这时可以在筛选培养基中加入适量的HIS3竞争性抑制剂3-AT(3-amino-1,2,4-triazole),以降低背景;或者增加一个筛选标记Ade来进行更加严格的筛选。加入的3-AT浓度过高,蛋白间比较弱的相互作用也可能被抑制,因此需要确定3-AT的最适浓度。
使用方法:
1.计算所需平板的数量,计算配置培养基体积;
2.设置3-AT的浓度梯度(建议设置10-50mM 的浓度梯度,常见浓度约30mM );
3.灭菌筛选培养基,待培养基冷却到55℃左右,加入3-AT 母液,摇匀后倒板;
4.标记每个平板的3-AT浓度,超净台冷却凝固后,将转化或培养物涂板;
5.28-30℃培养 3-5天。
注意:
理想情况 10mM浓度的3-AT平板会有少量生长,20mM浓度的3-AT不能或极少生长。如在80mM浓度的3-AT平板上生长的酵母不能用于双杂交筛选。自激活活性太高而不能进行双杂交筛选。
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文献和实验A Guide to Yeast Two-Hybrid Experiments(酵母双杂交实验指南)
*Correspondence: rfinley@wayne.edu Introduction The yeast two-hybrid system is a powerful genetic assay for protein-protein interactions (Chien et al., 1991; Fields and Song, 1989). The system has been used in thousands of studies
Two-hybrid analysis of genetic
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Membrane‐Based Yeast Two‐Hybrid System to Detect Protein Interactions
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