- ￥600 - 1600
- 信裕生物
- XYA2301
- 中国/上海
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
18
- 英文名：
5×Fast DNA Probe qPCR Mix
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
-20
- 规格：
250T/1000T×20 μl
5×Fast DNA Probe qPCR Mix
| 5×Fast DNA Probe qPCR Mix是采用探针法进行Real-Time PCR的专用试剂，适合于FAM/HEX/TET/JOE/ROX等双标记探针（本品也适用于Molecular Beacon探针），其中5×Fast DNA Probe qPCR Mix是将热启动Fast Taq DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP染料等试剂预混的5×浓度的单组分预混试剂。进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、探针、模板、水即可。该制品不含有ROX校正染料，适用于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量PCR机型。 5×Fast DNA Probe qPCR Mix中的Fast Taq DNA聚合酶采用专有的热启动技术确保55℃以下没有任何活性，因此可在室温建立反应体系。Fast Taq DNA聚合酶具有卓越的扩增速度，因此满足快速PCR程序，通常在30min以内可以完成扩增反应。同时该聚合酶具有耐受杂质的能力，同样适用于粗制核酸样本的扩增反应。 |
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组分 |
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主要特征 |
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应用 |
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| DNA和cDNA的相对定量检测。 | ||||||||
注意事项 |
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储存 |
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| 1. 长期保存，请避光置于-20℃或-70℃可保存３年。 2. 经常使用，融化后可置于4℃，可保存1年。 |
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反应实例 |
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| 以人MCF7细胞提取的总RNA（1.28 pg-20 ng）为模板进行反转录,反转录后分别取2 μl cDNA产物，应用5xFast DNA Probe qPCR Mix进行qPCR，扩增结果如图A: 扩增曲线；B：标准曲线。1-7RNA模板分别为：20 ng、4 ng、0.8 ng、0.16 ng、0.032 ng、6.4 pg和H2O。 | ||||||||
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文献和实验， Fast程序，以cDNA为模板进行。C. 目的基因的设置：有几个目的基因和目的基因的名称。D. 样品的设置：包括哪个是实验组，哪个是对照组。以及负对照的设置和生物重复的设置。E. 对照组和内参基因的设置：这个是为后面的定量做准备F. 反应程序的设置：PCR反应程序的设置要根据不同公司的MasterMix。比如BioTeke的95℃ 2分钟就可以激活DNA聚合酶（ABI的需要10 分钟）。循环反应是95℃15秒，60℃15秒的40个循环。溶解曲线程序采用仪器默认设置就可以。或者是仪器说明书上建议的程序
DNA Probe Purification Protocol
as follows: 260 DNA concentration = Absorbance × 50 × (Dilution Factor) ug/mL Probes greater than 500 bp in length can routinely be purified at >60% yield with greater than 95% removal of free nucleotides. Fragments ranging from 50 bp to 260 280
成功做完了逆转录，这时候可能有些疲累了。筛引物、做定量的时候要加样的孔也较多，即使使用了 qPCR 预混液，也有加错样的可能发生。诺唯赞的 ChamQTM SYBR® Color qPCR Master Mix 系列（Q411 /Q421 /Q431 /Q441）提供不同颜色的试剂，利用移液过程中的变色效应，追踪移液过程，可以极大的减少移液错误。 引物设计有原则 在使用 SYBR 染料法时，引物设计需遵循以下原则：引物长度 18～25bp，产物长度 80～300bp，GC 含量 40～60
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