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- 美国
- 2025年09月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
TCA法去除样本蛋白试剂盒
- 保存条件：
ReadiUse™ TCA Deproteinization Sample Preparation Kit
- 库存：
TCA法去除样本蛋白试剂盒
- 英文名：
ReadiUse™ TCA Deproteinization Sample Preparation Kit
- 规格：
200T
ReadiUse 三 氯 乙 酸（TCA)法去除样本蛋白试剂盒
氨基酸，离子，代谢物和其他小分子的分析经常受生物流体，细胞和组织裂解物中存在的脂质，蛋白质和酶的干扰而阻碍。 因此，在生物样品分析之前，脱蛋白是许多程序中的必要步骤。 AAT Bioquest的脱蛋白样品制备试剂盒提供了一种快速去除生物样品中蛋白质的方法。 通过应用三氯乙 酸（TCA）沉淀蛋白质。 除去沉淀的蛋白质后，用中和溶液中和样品的pH。 基于TCA的脱蛋白已成功且广泛用于样品制备之前，对小分子（例如糖原，ATP，cAMP，谷胱甘肽和抗氧化剂）进行定量。 该试剂盒中提供的TCA方法也可用于大规模去除蛋白质。 使用该试剂盒制备的生物样品可直接用于各种生化分析。
样品实验方案
1.蛋白质沉淀：
1.1均质和离心后，制备蛋白浓度小于50 mg / mL的澄清溶液样品。 将蛋白质样品放在冰上。 注意：高蛋白浓度的样品可能需要稀释。
1.2向100 µL蛋白质样品中加入10 µL冷的TCA（组分A）并短暂涡旋混合均匀。
1.3将样品在冰上放置10分钟。 以12,000 rpm离心5分钟。 将上清液（去蛋白样品）转移到另一个试管中。 注意：建议中和TCA中的样品，并立即用于相关测定。 但是，TCA中的脱蛋白样品可以在-70°C下保存长达一个月。
2.TCA中和：
2.1要中和过量的三氯乙 酸，可在收集的上清液中加入10 µL冷中和溶液（组分B），并短暂涡旋混合均匀。
2.2将样品在冰上放置5分钟。 现在将样品脱蛋白并中和。
2.3（可选）读取280 nm（OD）处的吸光度以检查样品是否脱蛋白。
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文献和实验参考文献
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Diazotization of kynurenine by acidified nitrite secreted from indoleamine 2,3-dioxygenase-expressing myeloid dendritic cells
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Discriminative determination of alkyl methylphosphonates and methylphosphonate in blood plasma and urine by gas chromatography-mass spectrometry after tert.-butyldimethylsilylation
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A comparison of analytic procedures for measurement of fractional dextran clearances
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Determination of paraquat in tissue using ion-pair chromatography in conjunction with spectrophotometry
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文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法，那这两种方法研究人员该如何选择呢？为了解决大家的疑惑，我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比较 （一）实验分组和开展实验确定： 此实验共分为 3 组，每组设置 2 个重复，所选原始样本是 293T 细胞培养上清。 组1：超离法分离（UC-1，UC-2）； 组2：使用某国外试剂盒 SXX（SXX-1，SXX-2）； 组3：使用某国内试剂盒 UXX（UXX-1，UXX-2）。 开展
分析实验。 解决方案 1. 血液越新鲜越好，在血液收集管中使用 RNA 稳定试剂来保存 RNA。 2. 血液 RNA 提取本质上是白细胞 RNA 提取，使用 Ficoll-Hypaque 密度梯度离心法回收单核细胞。 3. 去除抗凝剂和酶抑制剂。 4. 可采用专门用于血液样本的 RNA 提取试剂盒（如：QIAamp RNA Blood Mini Kit，货号：52304），其中含有高效的红细胞裂解液，在有效裂解细胞的同时也能防止其中释放出的大量 RNase 对后续 RNA 提取的影响。
沉淀。 5、开封后的 ECS 试剂有沉淀出现是否可以继续使用？ 答：沉淀物如果是结晶状，建议 56 度水浴摇晃混匀。如果结晶消失，则可以继续使用，少量沉淀不影响提取效果。 6、乳液提取试剂盒加 solution B 之后无豆花状固体，此时是否可以继续实验？ 答：不可以，必须在明确看到豆花状沉淀，溶液变透明后才可进行下一步操作。此时需要继续加入适量 solution B，并在 37 度水浴加热，直至看到豆花状沉淀。 7、如何选择血清和血浆样本来进行外泌体研究？ 答：血清和血浆都是常见的外泌体样本
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