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文献和实验NCB | 上交陈国强院士课题组揭示著名抑癌基因 PTEN 异构体 PTENα/β,有促进肿瘤生长的作用
和 146 个氨基酸序列,翻译成两个更长的异构体,PTENα 和 PTENβ3。此前,这两种异构体的在癌症的功能及机制依然不明。PTEN 异构体结构 4图片来源:Nature Cell Biology2019 年 11 月 4 日,上海交通大学副校长陈国强院士课题组在 Nature Cell Biology 发表了题为《PTENα and PTENβ promote carcinogenesis through WDR5 and H3K4 trimethylation》的长文 5。该文首次报道
Pst I 0101/0101 1 1 0102/0102 1 0 0103/0103
的方法是:用平末端克隆法将片段插入已去磷酸化的载体上,(或使用NEB平端克隆试剂盒 #E0103)。插入片段的5"末端应磷酸化,除非在引物合成时,引物的5"末端已有磷酸基。 PCR产物是否能在PCR反应体系中直接磷酸化? 不能,因为PCR反应中的硫酸胺会抑制T4多聚核苷酸激酶活性。可采用胶回收或G25离心柱法来纯化DNA。在50 μl反应体系,加入1×T4 Polynucleotide Kinase Buffer、1 mM ATP 和 小于200 pmol的5"羟基末端
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