探针法microRNA qPCR试剂盒，预混ROX1

一、试剂盒简介
本试剂盒用于microRNA的 qPCR预混液使用经热启动技术保护的经过特殊修饰的Taq DNA聚合酶，以及经过专门优化的qPCR缓冲系统，可进行基于探针的实时定量PCR（qPCR）进行microRNA检测。 混合物以2倍浓度提供。 同时，它提供了一管专用的探针，Universal 3'qPCR引物和U6引物，与EZBioscience®microRNA逆转录试剂盒（目录号：EZB-miRT4或EZB-miRT1）获得的cDNA完全匹配。 ）。 因此，它可以在宽广的动态范围内进行准确的靶标定量和检测，并可以对microRNA进行高度可重复且可靠的qPCR分析。

二、产品组分

*1: The ROX1 premixed is used to rectify the error of fluorescence signals between different wells.

三、保存条件
-20°C保存

四、试剂盒特点
1. 特异性高、定量准确：荧光探针只与目的序列结合，理论上探针法的荧光信号只来源于目的序列，即不受非特异性产物的影响，因此，探针法qPCR的特异性非常高，定量准确。
2. 实验耗时短：因探针法qPCR的高特异性，故无需再设置熔解曲线检测扩增产物的特异性如何，大大缩短了实验时间。
3. 兼容多重PCR反应：不同波长的荧光报告基团可以标记不同的探针，因此可以在同一个反应体系中利用不同荧光标记的探针同时检测多个靶标，达到节省实验成本的目的。
4. 适用范围广且简便：本试剂盒中预混了ROX1，无需另加ROX，减少了操作步骤，降低了误差，且适用于多种不同型号的仪器。


五、注意事项
1. 实验开始前首先简单验证引物是否适用：主要通过观察扩增曲线及Ct 值，扩增曲线正常、且 Ct 值在合理范围内（通常为 13 ~ 32 之间）的一般可以认为引物可用。
2. 引物验证后应该分装为几份，防止污染或降解。
3. microRNA 的质量及 cDNA 的质量对 qPCR 的结果具有很大的影响，应尽量防止 microRNA 降解，通常建议 RNA 提取后立即进行逆转录，且避免反复冻融。如果预计使用量较大，则可以一次多逆转几管 cDNA。如果不立即使用 cDNA，则建议保存在-80°C（有利于长期稳定保存）。
4. 各个组分在使用前都要上下颠倒混匀，短暂离心至管底。由于酶保存液中含有高浓度的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使枪头插入液面过深，否则会因枪头壁粘着造成损失，而使酶量不足。
5. 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
6.  配制反应液时，试剂请于冰上放置。
7. 本试剂盒使用的DNA聚合酶是化学修饰型热启动的DNA聚合酶，必须需要PCR反应前的95℃、5分钟的酶的活化反应。