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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 英文名:
EZ-press microRNA Reverse Transcription Kit
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50 Rxns
本试剂盒在一步分析中使用了Poly(A)拖尾反应和逆转录反应的方法来合成miRNA的第一链cDNA。通过使用大肠杆菌聚(A)聚合酶通过添加聚(A)延伸成熟转录本的3'末端来修饰总RNA中的成熟miRNA。然后,使用Oligo(dT)通用标签引物对修饰的miRNA进行通用逆转录,以合成所有miRNA的第一条链cDNA。该试剂盒可与microRNA探针qPCR试剂盒(目录号:EZB-miProbe / EZB-miProbe-R0 / EZB-miProbe-R1 / EZB-miProbe-R2)一起使用。
该试剂盒包含三管试剂:gDNA去除剂,miRNA RT酶混合物和4x miRNA RT缓冲液。
其中,gDNA去除剂主要包括浓缩的DNase和缓冲液。它可以降解超过95%的残留基因组DNA,仅需在室温(19〜27°C)下反应5分钟即可,从而大大降低了对结果的干扰。
miRNA RT酶混合物主要包含大肠杆菌Poly(A)聚合酶,逆转录酶和RNase抑制剂。大肠杆菌Poly(A)聚合酶不仅具有高效的Poly(A)拖尾反应效率,而且可以特异性识别成熟的单链miRNA,从而避免了具有双链结构的miRNA前体的逆转录反应。具有很强的抗干扰能力和放大能力。
4×miRNA RT Buffer试剂包含用于Poly(A)拖尾反应和逆转录反应的所有原材料和引物,包括Oligo(dT)-通用标签引物,缓冲液和dNTPs,并且经过仔细优化以确保Poly(A)高效地进行拖尾反应和逆转录反应。
二、产品组分
| Components | EZB-miRT4-S (20 Rxns) |
EZB-miRT4-L (50 Rxns) |
| gDNA Remover | 22 μl | 55 μl |
| miRNA RT Enzyme Mix | 44 μl | 110 μl |
| 4× miRNA RT Buffer | 110 μl | 275 μl |
| Nuclease free ddH2O | 1 ml | 1 ml |
三、保存条件
-20℃保存
四、试剂盒特点
1加尾法一步快速高效率将所有miRNA逆转录为可直接检测的cDNA。
2.无需设计miRNA特异性引物,仅需30分钟即可完成microRNA的逆转录,简单高效率。
3.需要与EZB-miProbe-R0、EZB-miProbe、EZB-miProbe-R1、EZB-miProbe-R2配套使用。
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
等)、miRNA 加尾法逆转录试剂盒做反转录:适用于短片段 RNA(主要为 miRNA)的加尾法。 4)qPCR 检测 采用 Umibio 2×SYBR Green qPCR 试剂:预混 ROX1 型适用于 ABI 5700 等设备、预混 ROX2 型适用于 ABI 7500 等设备。 5)数据分析:采用仪器自带的 QPCR 分析软件进行数据分析 可以看到 qPCR 检测外泌体可行且可靠,但实验过程并不简单,因此我们对经常会遇到的问题及解答也进行了整理,帮助大家更好的完成实验。 qPCR检测外泌常见问题及解决
qisanni05 请问 做一种microRNA逆转录用哪家公司的试剂盒性价比较高?谢谢您的帮助! 大鹏鸟 不知道你要做啥?RT-PCR? 国内挺多的,不过广州复能基因的貌似挺全、挺专业的。http://www.fulengen.com/product/reagent/qpcr_detect.php All-in-One First-Strand cDNA Synthesis Kit 采用
提供miRNA定量检测启动装,一个试剂盒里面包含逆转录、内参引、阳性对照、real-time PCR扩增所有的组分,您很快就可以学会定量分析microRNA的表达量了。 实验进行到这里,只是在进行miRNA量变的研究,更进一步可以升华到某些特定miRNA功能的探索,采用类似RNAi沉默技术,miRNA同样可以被沉默或者高表达,QIAGEN提供miRNA Inhibitors和miRNA Synthesis 产品来分别完成,详细的实验方案请见下回分解。 microRNA 研究实验导航—功能分析 找到差异
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