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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
500
- 英文名:
EZ-press Cell to cDNA Kit PLUS II
- 供应商:
EZBioscience
- 保存条件:
-20°C保存
- 规格:
100 Rxns
| Components | B0003C-S (10 Rxns) | B0003C (100 Rxns) |
| Cell Lysis Buffer | 2.2 ml | 22 ml |
| gDNA Remover | 22 μl | 220 μl |
| 4× Color CRT Mix | 55 μl | 550 μl |
| RNase free ddH2O | 1 ml | 2 ml |
三、保存条件
2.速度快。整个实验(从细胞到cDNA)可以在不到25分钟的时间内完成。
3.稳定且高度可重复。在整个实验过程中,总RNA得以完美保留,从而获得稳定且高度可重复的结果。
4.高灵敏度。每个样品的检测下限仅为1000个细胞。
5.该试剂盒中包含的gDNA去除剂可有效去除基因组DNA。
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分离高质量RNA 成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或SDS。RNA的质量决定了你能够转录到cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA纯化方法是使用异硫氰酸胍/酸性酚的一步法。Trizol试剂法(见下图)将一步法加以提高,可以从多种组织和细胞中提取高质量的非降解RNA。Trizol试剂法可以从最少100个细胞或1mg组织中提取RNA。TRIzol®试剂步骤略图 一般不必使用oligo(dT)选择性分离poly
-PCR 中,逆转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后通过 PCR 反应扩增 cDNA,为下游实验提供研究模板,因而逆转录酶是实验成功的关键步骤之一(如下图)。选定的逆转录酶应对所有样本均具有最高效率,即便是难转录 RNA 样本,如降解、抑制剂残留或具有高度二级结构的 RNA 样本。 图. 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。RT =逆转录,RTase =逆转录酶 常用的 RT-PCR 方法分为一步法和两步法,每种方法都各有优缺点,简要概述如下: 表. 对比一步法和两步法 RT-PCR 定量 RT
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