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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 应用范围:
Immunoprecipitation;Western Blotting
- 宿主:
Rabbit
- 抗原来源:
0
- 库存:
大量
- 适应物种:
Human;Mouse
- 是否单克隆:
1
- 规格:
100 μL
N-terminal 6His-tagged recombinant full length human GSK3β 详细描述见链接:http://www.millipore.com/catalogue/item/05-903
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文献和实验隆抗体,脱脂奶粉用于单克隆抗体,这样可得到较高的信噪比。预染的蛋白质Marker,可用于监测转膜的效率。 样品制备 原始样品可为细胞、组织、培养上清、免疫沉淀或亲和纯化的蛋白,以下为 定性检测目的蛋白时细胞样品的处理方法,其余的样品制备方法参阅相关文献。 1.培养细胞或药物处理。 2.弃培养基,用1X PBS漂洗细胞2次,去尽残留培养基。 3.加入1X SDS样品缓冲液(6-well plate,100μl /w或 75 cm2 plate
12000g,5 min,取上清。 7.电泳分离:上样15μl~20μl 至 SDS-PAGE 胶 (10 cm x 10 cm)电泳。 如要定量检测某蛋白的表达水平, 应用RIPA裂解液(1 ml per 107 cells/100 mm dish/150cm2 flask)裂解细胞, 收集裂解液至离心管中,在振荡器上混匀4~15min,14000g离心15min(4℃),弃沉淀,用Bradford法或其它蛋白质测定方法测定上清中蛋白浓度以调整上样体积和上样量,进行 Western杂交时还需
5% BSA (多抗)或 5%脱脂奶粉(单抗) Note: 一般来说, BSA被推荐用于多克隆抗体,脱脂奶粉用于单克隆抗体,这样可得到较高的信噪比。抗体的稀释度参考抗体说明书或根据实验确定。 n 预染的蛋白质Marker,可用于监测转膜的效率 样品制备 原始样品可为细胞、组织、培养上清、免疫沉淀或亲和纯化的蛋白,以下为定性检测目的蛋白时细胞样品的处理方法,其余的样品制备方法参阅相关文献。 1.培养细胞或药物处理。 2.弃培养基,用1X PBS漂洗细胞2次,去尽残留培养
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