- ￥1800
- IMMOCELL
- 厦门
- IM-R038
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
rRTEC大鼠肾小管上皮细胞
- 库存：
999
- 供应商：
IMMOCELL
- 肿瘤类型：
详询
- 细胞类型：
贴壁/悬浮
- 品系：
详询
- 组织来源：
肾小管
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
大鼠
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 器官来源：
详询
- 运输方式：
顺丰快递
- 年限：
永久
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
1*10^6
细胞名称: rRTEC,大鼠肾小管上皮细胞
种属来源: 大鼠
组织来源: 肾小管
细胞形态: 上皮细胞样
生长特性: 贴壁生长
培养基: DMEM，90%；FBS，10%。
生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37℃,
传代方法: 1：2 至 1：4，每周 3次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
支原体检测: 阴性
二、细胞培养操作
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
c、按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例；
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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- 内容
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文献和实验本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结，请分享！ 取材：1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法)： ①取 Wistar 大鼠断颈法处死，立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台，取腰部切口迅速取出肾脏，置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上，剪碎成1-2mm3大小组织块，网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
培养方法： 大鼠原代足细胞： 丁香园网友gaoxueyan99的观点为： 培养方法：过筛：100目，150目，200目，收集200目内为小球 1、选取100克左右大鼠，无菌取肾，去包膜，分离皮质，剪刀切成小块！ 2、100目上注射器芯研磨，DMEM培养液冲洗100目网筛多遍，DMEM冲洗200目内组织！ 3、离心管收集，1000转离心5分钟！ 4、完全培养基重悬沉淀，接种于培养瓶或皿！一只大鼠一皿或一瓶！ 5、5％CO2，37度培养箱最内测放置
水洗；④人孵育液，37C孵育2～4小时；⑤双蒸水洗2―3分钟；⑥入1％硫化铵液(新鲜配制)l一2分钟；⑦蒸馏水冲洗；⑧甘油明胶封固。3)结果与评价：阳性反应部位呈棕褐色硫化铅颗粒。该酶为可溶性酶，以冷固定效果较好，一般溶酶体膜为不通透性膜，但经冰冻熔化或福尔马林固定处理后，孵育液内的作用底物则进入溶酶体而被酶作用。酸性磷酸酶铅法染色大鼠肾小管上皮细胞呈棕色为酸性磷酸酶肛拦反应4)注意事项：孵育液内铅离子浓度是反应的关键因素，必须新鲜配制，立即使用。因为当铅离子浓度过低时，产生的磷酸离子未能完全被结合
