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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
24
- 样本:
血清,血浆或其他生物体液
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
详见说明书
- 检测方法:
Colormetric
- 检测范围:
7.81—500 ng/mL
- 规格:
96T
一、质量保证,有问题免费包换;
二、提供免费代测服务为客户提供来样检测服务,zui大限度实验结果的有效性;
三、提供全程技术指导。
| 产品名称 | 人补体片段3d(C3d)酶联免疫吸附测定试剂盒 |
| 英文名称 | Human C3d(Complement Fragment 3d) ELISA Kit |
| 货号 | XGH6368 |
该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组C3d浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人C3d抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人C3d会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人C3d抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人C3d抗体与结合在包被抗体上的人C3d结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,C3d浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中C3d的浓度。
反应类型 夹心法
规格 96T
反应时间 3.5h
反应性 Human
检测方法 Colormetric
检测范围 7.81—500 ng/mL
灵敏度 4.69 ng/mL
样本体积 100μL
样本类型 血清,血浆或其他生物体液
特异性
可检测样本中的人C3d,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
产品仅供科研典型数据
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照进行,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、Human C3d(Complement Fragment 3d) ELISA Kit样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以(OPD)为底物,则试剂盒提供剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
人转铁蛋白(TF)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:TF, PRO1557, PRO2086, TFQTL1, HEL-S-71p, transferrin Human TF(Transferrin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组TF浓度
人Dickkopf相关蛋白1(DKK1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:DKK-1, SK Human DKK1(Dickkopf Related Protein 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组DKK1浓度
人肾损伤分子1(KIM-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:HAVCR1, HAVCR, HAVCR-1, KIM-1, KIM1, TIM, TIM-1, TIM1, TIMD-1, TIMD1 Human KIM-1(Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组KIM-1浓度
二十烷(>99.5%(GC),标准物) Eicosane 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)试剂盒 Human beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit
二十一烷(>99.0%(GC),标准物质) Heneicosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 人β细胞素(BTC)试剂盒 Human beta cellulin,BTC ELISA Kit
二十二烷(>99.0%(GC),标准物质) Docosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒 Human β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit
二十三烷(>99.0%(GC),标准物质) Tricosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 人β抑制蛋白2(ARRB2)试剂盒 human ARRB2 ELISA Kit
二十四烷(>99.0%(GC),标准物质) Tetracosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 人β-转导素重复序列包含蛋白(BC)试剂盒 Human BC ELISA Kit
二十五烷(>99.0%(GC),标准物质) Pentacosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质 人γ氨基(GABA)ELISA检测试剂盒HumanGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T
正辛酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl n-Octanoate 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 人γ氨基(GABA)试剂盒 Human Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit
壬酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Nonanoate 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 人γ分泌酶试剂盒 Human γ-Secretase ELISA kit
甲酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Laurate 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 人γ分泌素激活蛋白(PION)试剂盒 Human PION ELISA Kit
肉豆蔻酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Myristate 质量规格:>99.5%(GC),标准物质 人γ干扰素(IFN-γ)抗体试剂盒 Human IFN-γ aibody ELISA kit
Human C3d(Complement Fragment 3d) ELISA Kit人β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)试剂盒 Human MSMB/PRSP ELISA kit O-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟胺盐酸盐(>98.0%(HPLC)(N)) O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine 质量规格:>98.0%(HPLC)(N)
人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)试剂盒 Human β-site APP-Cleaving Enzyme 1,BACE1 ELISA kit 壬烷(>99.5%(GC),标准物) Nonane 质量规格:>99.5%(GC),标准物质
人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)试剂盒 Human beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit 二十烷(>99.5%(GC),标准物) Eicosane 质量规格:>99.5%(GC),标准物质
人β细胞素(BTC)试剂盒 Human beta cellulin,BTC ELISA Kit 二十一烷(>99.0%(GC),标准物质) Heneicosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质
人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒 Human β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit 二十二烷(>99.0%(GC),标准物质) Docosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质
人β抑制蛋白2(ARRB2)试剂盒 human ARRB2 ELISA Kit 二十三烷(>99.0%(GC),标准物质) Tricosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质
人β-转导素重复序列包含蛋白(BC)试剂盒 Human BC ELISA Kit 二十四烷(>99.0%(GC),标准物质) Tetracosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质
人γ氨基(GABA)ELISA检测试剂盒HumanGamma-aminobyricacid,GABA 96T/48T 二十五烷(>99.0%(GC),标准物质) Pentacosane 质量规格:>99.0%(GC),标准物质
人γ氨基(GABA)试剂盒 Human Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit 正辛酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl n-Octanoate 质量规格:>99.5%(GC),标准物质
人γ分泌酶试剂盒 Human γ-Secretase ELISA kit 壬酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质) Methyl Nonanoate 质量规格:>99.5%(GC),标准物质
操作流程:
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
2酶标板置4℃,包被过夜。
3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理:在得出标本s和阴性对照n的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
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文献和实验C3d的定量检测采用ELISA双抗体夹心法,其原理为抗C3d血清能与C3、C3b、C3bi发生交叉反应,根据C3SP与C3在不同浓度PEG中溶解度的不同,用11%PEG溶解待测样本中C3d,然后加至包被抗C3d反应板中,再依次加入HRP标记的抗C3d抗体和底物OPD/H202,用4mol/L H2S04终止反应,于492nm读取吸光度,C3d含量与其吸光度呈正相关。 1、10mmol/LEDTA抗凝正常人或病人全血,2500rpm离心10min,取血浆置-70℃保存。 2、C3d标准
Evaluation of Complement Function by ELISA
Evaluation of total complement function in human serum is an essential component of laboratory diagnostics of the human complement system. During recent years, established hemolytic assays for classical pathway and alternative pathway
by a two- or three-step procedure. The method can insert any fragment into small or large episomes, without the need of an antibiotic selection gene. We have humanized the mouse luteinizing hormone receptor gene (Lhcgr ) by inserting a ~55 kb fragment from a BAC clone
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