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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避光
- 英文名:
BCECF AM(pH荧光探针, 5mM)
- 库存:
999
- 供应商:
Biorigin
- 规格:
50 μL
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文献和实验(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 (二)SNARF-1定量比率测定pH值 1. 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光
固相pH梯度的优缺点 固相pH梯度可窄至pH0.1的范围,因此分辨率极高,可达0.001pH;pH梯度稳定,不漂移;灵活性大,可随意选择pH梯度和斜率;重复性好;加样容量大;样品中盐的干扰小;对碱性蛋白质也能很好的分离,无边缘效应,故可用很窄的胶条(如5mm宽)聚焦,特别适合于双向电泳的第一相,但固相pH梯度灌胶技术复杂,只能使用聚丙烯酰胺凝胶,电泳时候需要高电压,电泳时间长,窄范围pH测定困难,只能计算。 pH范围的选择 固相pH梯度分辨率高,故使用预窄pH范围的分离,对未知样品,应
体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等,这些探针均为疏水性探针,须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4~6之间,如溶酶体pH的检测,该探针也不能透过质膜,但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体,因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5. 细胞








