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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
MG-132
- 抗体英文名:
MG-132
- 浓度:
1mg/1ml
- 应用范围:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
Store at -20
- 形态:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 免疫原:
详见说明书
- 规格:
1 mg
抗体制备过程:
1.材料与试剂 a.提取的动物 Ig b.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂 c.青霉素和链霉素 d.实验动物 兔 e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
几种抗体概述:
1.抗角蛋白抗体(AKA),又称为抗丝集蛋白抗体或抗角质层抗体。AKA是类风湿关节炎早期诊断和判断预后的指标之一,其对RA患者的诊断的特异性为94% ,而其敏感性为47% ,并是一种鉴别RA和与多发性关节炎相关的丙型肝炎患者的有效检验标记物。
2.抗核周因子( APF), 是定位于口腔黏附膜细胞胞质内的颗粒性蛋白复合物。可在RA患者的血清和关节液中测出,与性别、年龄无关。APF显示了较强的特异性(73%~99%)和敏感性。用间接免疫荧光法检测,方法精密度较差。
3.抗环瓜氨酸肽抗体(CCP),具有相对好的敏感度和特异性。其实,抗核周因子和抗角蛋白抗体,与CCP在化学结构上具有相关性,它们的表位都含有瓜氨酸,称为瓜氨酸相关自身免疫系统。
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文献和实验Zymolyase Dissolve in 10% glucose. Store aliquots (25 µl) at 20o C in common freezer for stock solutions Use once and dispose Comments: alternative is to dissolve in SCE, 40% gycerol, 20 mg/ml final. Can use
Oxalyticase Dissolve in 0.1 M NaCl, 0.02% Na azide, 50% glcyerole Store aliquots (1 ml) at 20o C in common freezer for stock solutions 上一篇:ALPHA FACTOR ARREST AND RELEASE 下一篇:GLASS BEADS
摘 要一、人成骨肉瘤MG-63细胞株和成人成骨细胞的培养与分化特性的观察目的:观察人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞分化的特性。方法:在细胞培养的不同时间,用α-磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定骨钙素(BGP)含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测I型胶原、MMP-1、TIMP-1基因mRNA表达;Van GieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果:人成骨肉瘤MG-63细胞株接种培养第7天后I型胶原基因表达较高。MMP-1表达量随时间
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