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- 2025年07月15日
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详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1盒
超敏化学发光底物(A液+B液)操作步骤：
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。本产品仅供科研活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
产品名称：超敏化学发光底物(A液+B液)
英文名称：
产品规格：1盒
发货周期：1～3天
产品保存：4℃密封避光保存，一年有效
产品说明：Western blot 底物发光检测试剂是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂，采用独特的发光底物系统，并对成份进行了优化。产品背景低，稳定性好，信号的灵敏度及强度高，发光时间持久。比普通 ECL 试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对×光胶片曝光，也可直接进行 lμminometer 检测或者荧光 CCD 扫描。
产品特点：
1．高信噪比，背景低。
2．发光迅速。
3．可在日光灯下进行发光操作。
4．灵敏度高：可检测 femto 级抗原。
5．发光持续时间长，可进行反复曝光，进行结果优化，而不需重复 Western blot。
6．节约抗体，包括一抗二抗。超敏化学发光检测试剂因灵敏度高，可使用较高抗体稀释比例。一抗稀释 1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/ml ；二抗稀释 1:20000-1:100000或10-50ng/ μl。
使用方法：
1．执行常规 SDS－PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。
2．膜的封闭:用 TBS-T 液洗涤印迹膜 10minX2。放入 5%脱脂奶粉封闭液内，摇床震动，室温封闭1小时。
3．一抗孵育：去除封闭液，并加入稀释好的一抗，用摇床震动，室温孵育2h或4℃孵育过夜。
注意：好使用推荐的一抗稀释比例，稀释一抗使用封闭液稀释。
4．用 4-6倍 TBS-T洗涤印迹膜，10minX3。增加洗液量，和/或洗膜的次数可降低背景。
注意：洗涤之前，用 TBS-T洗液将印迹膜进行简单的漂洗，将会增加洗膜的效果。
5．二抗孵育：将一抗孵育后的印迹膜放入适当稀释的HRP 标记的二抗中孵育，摇床震动，室温孵育2 小时。
注意：好使用推荐的HRP 标记二抗的稀释比例，稀释二抗使用封闭液稀释。
6．重复第 4 步，以去除非特异性 HRP 标记二抗的结合。
注意：与 HRP 标记二抗孵育后，必须彻底地清洗印迹膜。
7．制备工作液：按每 1 ml 蒸馏水加 A 液和 B 液各 50μι，混匀组成作液即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准。每10cm2膜需要大约1ml工作液。
8．将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上，加上配好的发光底物工作液。
9．将印迹膜与工作液孵育1-5min。
注意：孵育的时间可以在暗室里观察，以判断是否进行胶片曝光。
10．将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上，只要保鲜膜或透明的玻璃纸比较大可以不用吸除多余的工作液，轻轻赶出其间的气泡。
11．在暗室中取一张×胶片小心置于膜上，曝光 5 秒至 1分钟，立即显影定影。
注意：根据其发光的强度,缩短或延长×片的曝光时间(对微弱信号，曝光时间可延长至数小时),或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
具有显著特点：
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录本产品仅供科研
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是超敏化学发光底物(A液+B液)的相关产品：
CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸达泊西汀(混旋)质量规格：>99%,混旋Dapoxetine hydrochloride
小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL盐酸达泊西汀(右旋)质量规格：>99%,右旋Dapoxetine hydrochloride
HCAEC人冠状动脉内皮细胞 HCAEC in human coronary artery endothelial cells ECM(Sicencell Cat#1001)固K盐质量规格：>80%,BRFast Black K Salt
IL11 Protein Human 重组人 IL11 / Ierleukin 11 / IL-11 蛋白氨基10B质量规格：ARAmido black 10B
RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2 Jecket(瘤细胞)1-癸烷磺酸钠[离子对色谱级]质量规格：离子对色谱用试剂IPC-ALKS-10
CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人细胞裂解液 (阳性对照) 缓激肽Bradykinin质量规格：>98%
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1D 13223 (氟吡汀代谢产物)D 13223 (Flupirtine Metabolite)质量规格：美国进口
973细胞，人肺癌细胞 小鼠成骨细胞系,MC3T3-E1细胞 CL-0138Lec1(仓鼠卵巢细胞)5×106cells/瓶×2伊潘立酮-d3Iloperidone-d3质量规格：美国进口
THP-1(人髓系白血病单核细胞) 5×106cells/瓶×2亚胺培南一水合物Imipenem Monohydrate质量规格：美国进口
NHDF-c adult 正常人皮肤成纤维细胞(NHDF)来自成年捐献者 500,000cells 成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)5-羟基吲达帕胺5-Hydroxy Indapamide质量规格：美国进口
人肺癌细胞;A-427 [A427]TOLUIDInepLUEOCERTIFIED胺蓝O生物染料级100G92-31-9RT
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL2-二安基基本酚;2-羌基-N,N-二基苄安 2-DiMqthylcMinoMqthylphqnol 10-62-0
SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞 MouseTESwo7iumSALTTES, 钠盐超级25G70331-82-7RT
CR2 Others Human 人 CD21 / CR2 / C3DR 人细胞裂解液 (阳性对照) TRIS1.0MPH7.5STERILETris溶液超级500MLRT
人少突胶质前体细胞RNAHOPC miRNA5 μg8-Azaguanine 1vial/1vial*5 Sigma A5284
超敏化学发光底物(A液+B液)CD84 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) 发烟25克
人心脏成纤维细胞-心室裂解物HCF-av L2-基-2-炳1醋-2-(2-氧基氧基) 2-(2-MqTHOXYqTHOXY)qTHYL MqTHcCRYLcTq 42103-28-0
CCD-1095Sk细胞，人浸润性导管癌旁皮肤细胞 鼠肝癌细胞,H22-H8D8细胞 脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)片1克
BC3H1(小鼠脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2NADHDIwo7iumSALTTRIHYDRATE还原型辅酶Ⅰ二钠,三水试剂级黄色粉末FROZENsigma
HUASMC Pellet 人脐动脉平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人前列腺上皮细胞裂解物HPEpiCL10365-98-73-甲氧基本基硼酸3-metxoxypxenylboronic acid
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。本产品仅供科研活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
产品名称：超敏化学发光底物(A液+B液)
英文名称：
产品规格：1盒
发货周期：1～3天
产品保存：4℃密封避光保存，一年有效
产品说明：Western blot 底物发光检测试剂是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂，采用独特的发光底物系统，并对成份进行了优化。产品背景低，稳定性好，信号的灵敏度及强度高，发光时间持久。比普通 ECL 试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对×光胶片曝光，也可直接进行 lμminometer 检测或者荧光 CCD 扫描。
产品特点：
1．高信噪比，背景低。
2．发光迅速。
3．可在日光灯下进行发光操作。
4．灵敏度高：可检测 femto 级抗原。
5．发光持续时间长，可进行反复曝光，进行结果优化，而不需重复 Western blot。
6．节约抗体，包括一抗二抗。超敏化学发光检测试剂因灵敏度高，可使用较高抗体稀释比例。一抗稀释 1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/ml ；二抗稀释 1:20000-1:100000或10-50ng/ μl。
使用方法：
1．执行常规 SDS－PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。
2．膜的封闭:用 TBS-T 液洗涤印迹膜 10minX2。放入 5%脱脂奶粉封闭液内，摇床震动，室温封闭1小时。
3．一抗孵育：去除封闭液，并加入稀释好的一抗，用摇床震动，室温孵育2h或4℃孵育过夜。
注意：好使用推荐的一抗稀释比例，稀释一抗使用封闭液稀释。
4．用 4-6倍 TBS-T洗涤印迹膜，10minX3。增加洗液量，和/或洗膜的次数可降低背景。
注意：洗涤之前，用 TBS-T洗液将印迹膜进行简单的漂洗，将会增加洗膜的效果。
5．二抗孵育：将一抗孵育后的印迹膜放入适当稀释的HRP 标记的二抗中孵育，摇床震动，室温孵育2 小时。
注意：好使用推荐的HRP 标记二抗的稀释比例，稀释二抗使用封闭液稀释。
6．重复第 4 步，以去除非特异性 HRP 标记二抗的结合。
注意：与 HRP 标记二抗孵育后，必须彻底地清洗印迹膜。
7．制备工作液：按每 1 ml 蒸馏水加 A 液和 B 液各 50μι，混匀组成作液即可使用。用量以充分覆盖印迹膜为基准。每10cm2膜需要大约1ml工作液。
8．将印迹膜有蛋白的一面朝上平整的铺在一张平板上，加上配好的发光底物工作液。
9．将印迹膜与工作液孵育1-5min。
注意：孵育的时间可以在暗室里观察，以判断是否进行胶片曝光。
10．将一洁净的保鲜膜或透明的玻璃纸平整的铺在孵育有工作液的印迹膜上，只要保鲜膜或透明的玻璃纸比较大可以不用吸除多余的工作液，轻轻赶出其间的气泡。
11．在暗室中取一张×胶片小心置于膜上，曝光 5 秒至 1分钟，立即显影定影。
注意：根据其发光的强度,缩短或延长×片的曝光时间(对微弱信号，曝光时间可延长至数小时),或者曝光一系列不同的时间后再显影定影挑选一张满意的。也可用合适的照相器材直接记录蛋白膜的化学发光图像。
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
具有显著特点：
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录本产品仅供科研
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是超敏化学发光底物(A液+B液)的相关产品：
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小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL盐酸达泊西汀(右旋)质量规格：>99%,右旋Dapoxetine hydrochloride
HCAEC人冠状动脉内皮细胞 HCAEC in human coronary artery endothelial cells ECM(Sicencell Cat#1001)固K盐质量规格：>80%,BRFast Black K Salt
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CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人细胞裂解液 (阳性对照) 缓激肽Bradykinin质量规格：>98%
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1D 13223 (氟吡汀代谢产物)D 13223 (Flupirtine Metabolite)质量规格：美国进口
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SP2/0, 小鼠骨髓瘤细胞 MouseTESwo7iumSALTTES, 钠盐超级25G70331-82-7RT
CR2 Others Human 人 CD21 / CR2 / C3DR 人细胞裂解液 (阳性对照) TRIS1.0MPH7.5STERILETris溶液超级500MLRT
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CCD-1095Sk细胞，人浸润性导管癌旁皮肤细胞 鼠肝癌细胞,H22-H8D8细胞 脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)片1克
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液界 liquid junction 指二种浓度或不同组成的电解质的接触面。液界可简单地把比重轻的溶液由重叠在重液之上而形成，但随着时间的进行，由于扩散或对流等可多少出现液体的混合。为防止混合可采取放置多孔质的膜以延缓扩散，或不断流动液体更新液界等方法。在液界上可产生液界电位（ liquid junction potential， EL ）。比较简单的是在浓度不同的同一种一价的电解质溶液间或浓度相同并且具有共同的离子的不同的电解质溶液间的情况下，液界电位的大小与液界的混合
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培养 24 - 48 h，细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基： 待细胞汇合度~50%时，移去原有完全培养基，添加新培养基进行培养，新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成； 待细胞生长汇合度约为70-80%时，移去培养基； 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次； 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h，待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液，该上清液即可用于外泌
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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