CEN8q（德州红）FISH探针/CEN8q（德州红）FIS

荧光原位杂交（FISH）探针的制备及其应用

体异常的识别得益于二十世纪六十年代后发展起来的胰蛋白酶－姬姆萨染色和常规显带技术，使得常规筛查全基因组染色体异常和检测染色体核型改变成为可能。染色体显带是细胞遗传学分析技术中标准和常用的方法，但耗时且依赖于获得良好的分裂相，还难于分析复杂和隐匿的异常。 PCR或荧光原位杂交（FISH，fluorescent in situ hybridization）对染色体异常的检出依赖于引物或探针与模板的结合，因此较常规显带具有更高的特异性，是高通量检测染色体异常的敏感和特异的方法。

　DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用

，镜检其显色情况。 （2）缓冲IV（10mmol/l Tris �HCl, 1mmol/L EDTA, pH8.0）10min终止反应，甲绿复染5min，二甲苯透明，DPX封固，镜检。 （二）荧光标记DNA探针的应用 　　1．概述在原位杂交细胞化学中荧光标记DNA探针（Fluorescence in situ DNA hybridisa－tion , FISH）的应用在 细胞培养 和染色体铺片（见二十一章　）中较为广泛。FISH属于非放射性标记

荧光原位杂交技术

荧光素。故可在荧光显微镜下直接观察。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素(FITC)、得克萨斯红(Texasred)、罗丹明(rhodamine)及其衍生物四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethyl rhodamine isothiocyanate,TRIT)等。该方法简单快捷，但信号较弱．敏感性较低。间接法使用非荧光物质标记的探针。如生物素或地高辛等标记探针，再通过亲和连接或免疫反应带人荧光物质来检测杂交体的存在。因为有杂交信号放大作用，从而增加了杂交的敏感性。也降低了实验成本。故间接法FISH是目前使用较多