NSD1 / CEN5q鱼探针/NSD1 / CEN5q鱼探

real-time PCR技术的原理及应用

反应条件；   对引物特异性要求较高。方法二：TaqMan---水解型杂交探针  **5′端标记有报告基团(Reporter, R)  ，如FAM、VIC等 　　**3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)　　** 探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光　　**Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 （一）工作原理 注意：每扩增一条DNA分子，释放一个荧光信号，可以在循环过程中任一点检测荧光 PCR反应的建立

双荧光素酶检测的原理和应用

过程相对简单，检测灵敏度较高；Western blotting操作过程繁琐，检测灵敏度较低。3、荧光素酶报告基因检测只需要成功将含有目标DNA序列插入到报告载体中，即可进行后续实验，Western blotting则需要购买商品化的一抗，一般价高量少，且抗体的杂交条件需要摸索；若自制的一抗，抗体效价需要验证，实验周期较长。六、参考文献Pan, Y., R. Geng, N. Zhou, G. F. Zheng, H. Zhao, J. Wang, C. M. Zhao, X. B. Qiu, Y. Q

如何做好 Southern 杂交？

液（8 cm × 8 cm 的膜加 5 mL 即可），将膜的背面贴紧杂交瓶壁，正面朝向杂交液。放入 42 ℃ 杂交炉中，使杂交体系升到 42 ℃。取经超声粉碎的鲑鱼精 DNA（已溶解在水或 TE 中）100 ℃ 加热变性 5 min，迅速加到杂交瓶中，使其浓度达到 100 μg/mL。继续杂交 4 hr。鲑鱼精 DNA 的作用是封闭 NC 膜上没有 DNA 转移的位点，降低杂交背景、提高杂交特异性。2．杂交倒出预杂交的杂交液，换入等量新的已升温至 42 ℃ 的杂交液，同样加入变性的鲑鱼精 DNA。将探针