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文献和实验原理: 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂:1. 苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用; 2. 甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2 混合加水至100ml; 3. 甘油明胶:将12g明胶
3)Giemsa染色 1.收集细胞(1×106),PBS洗1次。 2.用细胞涂片离心机制成细胞涂片。 3.甲醇固定3~5min。 4.入Giemsa稀释染色液15~30min,冬天在37℃温箱中染色。 5.用磷酸盐缓冲液分色,以镜下控制为准。 6.涂片晾干后用中性树胶封片。 4)瑞氏(Wright)染色 1.收集细胞(1×106),PBS洗1次
苯( 1 : 1 )稍洗。8、 二甲苯透明 2 ~ 3 次。9、 中性树胶封固。 (三) Giemsa 染色 1、收集细胞( 1 × 106 ), PBS 洗 1 次。2、用细胞涂片离心机制成细胞涂片。3、甲醇固定 3 ~ 5min 。4、入 Giemsa 稀释染色液 15 ~ 30min ,冬天在 37 ℃温箱中染色。5、用磷酸盐缓冲液分色,以镜下控制为准。6、涂片晾干后用中性树胶封片。(四)瑞氏( Wright )染色 1、收集细胞( 1 × 106 ), PBS 洗 1 次。2、用细胞涂片离心机制成细胞涂片
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