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- 2026年01月06日
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- 提供商：
上海研匠生物科技有限公司
- 服务名称：
流式分析服务
一、技术简介：
细胞表面分子抗原的流式荧光检测是最常用的流式细胞分析方法之一，使用目的蛋白的荧光抗体标记目的细胞，通过流式细胞仪来检测有荧光信号的细胞，从而分析和判断待测细胞群体中目的蛋白表达阳性率。比较不同条件处理的实验组之间，细胞表面蛋白的表达差异。
不同荧光物质标记的抗CD3、CD4、CD8、CD19、CD16抗体分别标记T细胞，B细胞，NK细胞，流式细胞仪分析待测细胞，可计算出CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16+的相对含量，从而得到各细胞群的相对比值
二、实验流程
A: 服务内容：新鲜组织单细胞悬液制备，磁珠分选，流式分选，流式分析，培养细胞的细胞磁珠分选，流式分析，细胞代养
B:样本运输：
- 新鲜组织样本：离体后组织制成单细胞悬液，加入PBS/培养基内4℃运输。
- 细胞样本：培养瓶常温运输
- 血液样本：将血液采集在EDTA/肝素钠的采血管内，按1：8（保护液：血液）的比例加入，混匀，4℃运输。
C.样本前处理及检测
新鲜组织样本—酶消化制作单细胞悬液—细胞计数—荧光抗体染色—上机分析—提供实验报告
培养的细胞—细胞计数—荧光抗体染色—上机分析—提供实验报告
三、服务说明及结果
1. 客户提供：染好的样本或未处理的样本（公司代为处理）
2. 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果。
3. 实验周期：3个工作日。 
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文献和实验FlowJo 是美国斯坦福大学 Leonard Herzenberg 实验室研发的一款流式数据分析软件，它可以对所有流式细胞仪产生的数据进行分析，在多种电脑操作系统上兼容性良好。由于功能强大，简单易用，已经被生命科学领域内的科学家、实验室广泛使用；同时 FlowJo 也是各高影响力核心期刊最受欢迎的流式数据分析软件。本文主要针对流式分析中常用的平均荧光强度 (MFI)，五个小步骤带你快速分析出 MFI。打开 FloJo，显示工作台。找到原始数据（fcs 格式文件）Ctrl+A 将所有文件全选
对照 所有的REAfinity抗体都是人IgG1亚型；因此，对于超过1万种REA克隆号的所有抗体来说，只需选用一种类型的同型对照抗体即可。根据抗原表达位置不同，该通用型同型对照抗体分为膜表面型和胞内型两类，无需花费时间寻找合适的同型对照抗体。 图2：使用REAfinity抗体时，只需一种通用型同型对照，降低了实验设计的复杂程度 无需Fc受体阻断 REAfinity抗体Fc段经基因突变改造，从而消除了抗体与Fcγ受体的非特异性结合。因此，在流式分析中，无需额外增加阻断步骤。 优选序列，染色指数高 挑选最佳克隆号的抗体
流式课堂 | 裂红 or 分离液？外周血不同制备方法应用场景
、粒细胞等），需要裂解红细胞；倘若检测的是红细胞，不需要裂解红细胞； ⊙ 如果后续样本不用于流式分析，而是需要培养或者冻存复苏，使用裂红后培养的细胞，活性可能会打折扣。 Ficoll 密度梯度离心法 01 原理 根据细胞的沉降系数差异，借助细胞分离液和离心操作，对细胞进行分离。 02 优点 ⊙ 获得的细胞更纯净，有利于细胞培养后检测胞内因子 ⊙ 可将细胞冻存后再复苏、培养、检测 ⊙ 去除死细胞 03 缺点 ⊙ 步骤复杂，需 30min 以上 ⊙ 取白膜层需要丰富的经验 ⊙ 只能获得淋巴细胞和单核
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