- ￥1000
- SHBio
- 进口
- SHC5290
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | 2V6.11 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-0328 |
| 中文名称： | 人胚肾细胞 |
| 组织来源： | 肾; 用腺病毒5(Ad5)DNA转化; 用腺病毒前区4质粒DNA转染。 |
| 形态特征： | 上皮细胞样 |
| 生长特性： | 贴壁生长 |
| 特征特性： | 这株细胞是2001年从人胚肾细胞株293衍化而来。293细胞用携带Zeocin-抗性标记的质粒pVgRXR转染得到293pVgRXR细胞。随后,用包含编码E424K的Ad5E4ORF6基因的质粒pEKORF6转染。pEKORF6从包含潮霉素抗性基因的质粒pIndHydro衍生而来。载体包含SV40病毒序列。2V6.11细胞株最初从含潮霉素的培养液中用克隆环分离单克隆得到。2V6.11细胞诱导表达的人腺病毒E434KDa蛋白可通过免疫印迹法检测。这株细胞可以用作研究腺病毒E4癌基因的工具。 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | MEM培养基(GIBCO,货号41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，Sodium Pyruvate 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。 |
| 传代方法： | 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 冻存条件： | 基础培养基+8%DMSO+20%FBS |
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文献和实验星状病毒为一种直径28～30nm的球形病毒颗粒，表面有5～6个星芒状突起。在健康成人、儿童及婴幼儿粪便均可查见此种病毒。目前认为当星状病毒在肠道内大量繁殖时引起胃肠炎。本病无明显季节性，一般为散发性，但也可呈暴发流行，无症状而携带病毒的乳儿可引起托儿所哺乳班幼儿胃肠炎的暴发流行。发病以婴儿为多，临床表现类似于轮状病毒胃肠炎，但症状较轻。诊断主要根据大便接种人胚肾细胞培养后免疫电镜或免疫荧光检查结果。
单纯疱疹病毒（HSV）： （1）生物学性状：单纯疱疹病毒为有包膜的DNA病毒，为双股线状DNA。该病毒能在多种细胞内增殖，如原代兔肾、人胚肺、人胚肾细胞或地鼠或肾细胞等。细胞被感染后很快发生病变。如细胞肿胀、变圆、出现嗜酸性核内包涵体医学教育网`搜集整理。该病毒可感染的动物种类较多，如家兔、豚鼠、小鼠等。该病毒有两种血清型，HSV-1和HSV-2.两型病毒的DNA有5%同源性。 …… 点击查看更多：bbs.med66.com/forum-267-250/topic
腺病毒可以在293A细胞中进行转录，表达并可进行包装复制出大量高滴度病毒。293T是一种逆转录包装表达细胞，我做过也可进行表达，但还没有具体鉴定表达后的病毒是否可用。293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒（Ad 5）DNA的永生化细胞，表达转染的腺病毒5的基因。细胞来源都是人肧肾上皮细胞，293T细胞表达E1A蛋白，SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞，组成性表达E1A 和E1B 蛋白
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