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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
NCI-H209 [H209]细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | NCI-H209 [H209] |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-0236 |
| 细胞数量: | 1*10^6 |
| 组织来源: | cervix; derived from metastatic site: lymph node |
| 细胞种属: | Homo sapiens |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 生长特性: | adherent |
| 培养基: | MEM+10% FBS+1% P/S |
| 形态特征: | epithelial |
| 传代方法: | 1:2-1:4 |
| 培养条件: | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞描述: | 该细胞由Gazdar AF及其同事于1979年从一名小细胞肺癌患者的骨髓转移灶中分离建立,该骨髓标本的获取先于患者的治疗。该细胞是一种典型的小细胞性肺癌细胞,表达较高水平的4种生化标志:神经特异性烯醇、肌酸激酶脑型同工酶、左旋多巴脱羧酶、铃蟾肽样免疫活性。c-myc DNA序列没有扩增;未发现大的结构DNA的异常;该细胞合成与正常肺相当量的p53 mRNA。该细胞以聚集体的形式悬浮生长,只有聚集体中的细胞是有活力的,但是细胞活率无法估计,一般培养基中含有大量的细胞碎片。该细胞表达异常的RB1蛋白,其706 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中 |
| 复苏细胞步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | :待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存: | Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输: | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |








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文献和实验都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
细胞治疗是细胞和基因治疗的重要组成部分,它通过使用特定类型的细胞来修复、替换或调节受损的组织和器官。在细胞治疗中,不同类型的细胞因其独特的生物学特性而被广泛应用于多种疾病的治疗。以下是一些常用的细胞类型及其在细胞治疗中的应用。 (1)免疫细胞 免疫细胞是细胞治疗中最重要且研究最多的细胞类型之一,主要包括 T 细胞、自然杀伤细胞(NK 细胞)和树突状细胞(DC 细胞)。 T 细胞:T 细胞是人体免疫系统的核心细胞,具有强大的抗肿瘤能力。CAR-T 细胞疗法是目前最成功的免疫细胞治疗技术
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