- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC1762
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
hTERT-HPNE细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | hTERT-HPNE |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-1371 |
| 中文名称： | 人胰腺导管上皮细胞 |
| 细胞数量： | 1*10^6 |
| 组织来源： | 胰腺导管；HGNC-TERT转化；男性 |
| 细胞种属： | 人 |
| 生长特性： | 贴壁 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养基： | 75%DMEM(无糖)+25%Medium M3 +5%FBS+10ng/mlrh EGF+2.5mMD-glucose+750 ng/ml puromycin+1%P/S |
| 传代方法： | 1:2-1:4 |
| 培养条件： | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存： | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
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文献和实验【求助】人端粒酶逆转录酶mRNA 甲胎蛋白mRNA的检测问题
fanghuan1986 肝病患者外周血中怎么能检测到肝组织中的人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA和甲胎蛋白mRNA 呢？本人认为转录水平应该发生在肝细胞中的，外周血中应该检测不到转录水平。恳请给予指教，不胜感激。 woxingwosu 现在的研究已经表明了人的外周血中确实存在DNA和mRNA（Circulating DNA or RNA），一些癌症的患者（肝癌，肠癌，乳腺癌等等）的外周血中的一些mRNA含量有所
-a刺激细胞成熟三、相关应用 1、瞬转树突状细胞 用包装好的病毒，直接感染DC这样做的，是腺病毒载体，方法如下： （1）将培养成功的DC以5×106/孔接种到6孔Costar细胞培养板中； （2）每孔加入MOI为200的（Ad-目的基因），37℃、5% CO2饱合湿度下以最小体积的培养液转染4小时。对照组采用相同MOI的Ad-LacZ腺病毒； （3）添加新鲜培养液，继续培养48小时后收获DC； （4）免疫组织化学检测hTERT的表达
扩增，能有效地扩增2～9kbp的大片段未知序列(流程如图2所示)。 黄君健等成功地应用P-PCR技术从正常的人外周血单核细胞基因组DNA中扩增端粒催化亚基hTERT基因5'端上游旁侧序列，获得了hTERT基因翻译启始位点上游2090bp的基因组DNA序列。首先用酶切消化基因组DNA，得到带有GATC的5'突出端的DNA片段。然后利用已知的hTERTcDNA序列设计PCR引物，用常规的PCR方法扩增出1条大约900bp的基因组特异片段，序列分析为hTERT的基因组DNA片段。根据得到的基因组DNA序列
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