- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC1696
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
CCC-HIE-2细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | CCC-HIE-2 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-1451 |
| 中文名称： | 人胚胎肠粘膜来源细胞 |
| 细胞数量： | 1*10^6 |
| 组织来源： | 胚胎；肠粘膜 |
| 细胞种属： | 人 |
| 生长特性： | 贴壁 |
| 培养基： | 1640，90%；FBS，10%；双抗。 |
| 传代方法： | 1:2-1:4 |
| 培养条件： | Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 细胞冻存： | Freeze medium: FBS/NBS, 92%;DMSO, 8%（for reference）Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
| 细胞运输： | 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输（T25细胞瓶） |
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文献和实验胎胰腺组织来源细胞(自建)CCC-HB-2 人胚胎膀胱组织来源细胞(自建)CCC-HIE-2 人胚胎肠粘膜细胞(自建)CCC-HBE-2 人胚胎气管细胞(自建)
, 0. 1mM 苯甲基磺酰氟(DMSF ) , 5mM B2巯基乙醇, 0. 5% CHA P s(Pierce) 和10% 甘油。 (3)冰育30 分, 然后在超速离心机中离心30 分钟。 (4)去上清, 液氮速冻沉淀, 裂解细胞于-80℃保存。 二、扩增 (1)在微量管中冻干0. 1ug 荧光标记的cx反转引物, 蜡封(5′CCC TTA CCC TTA CCC TTA CCC TTA 3′)。 (2)于蜡界之上加50ul TRA P 反应物, 包括T ris-Cl (pH8. 3) 20
min孵育后，PBS洗涤，FACS固定液200μl加入每管，4℃保存用于流式细胞仪检测。 方法2、特异性的PCR引物（北京戴诺生物技术有限公司，电话：010-67806708转204）进行PCR(PCR-SSP)应该也可以进行测定，比较简单些，以下为参考： 引物： 上游引物：5’-CCT CGT CCC CAG GCT CT-3’ 下游引物：5’-CCC CTG GTA CCC GT-3’ 产物
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