- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC1651
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
CCC-ESF-1细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | CCC-ESF-1 |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-1500 |
| 中文名称： | 人胚皮肤成纤维细胞 |
| 规格： | T25 |
| 组织来源： | 胚胎；皮肤；成纤维细胞 |
| 形态特征： | 成纤维 |
| 生长特性： | 贴壁生长 |
| 特征特性： | 取材自引产的15周胚胎组织，由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。 |
| 培养条件： | DMEM+10%FBS |
| 传代方法： | 1:3传代；4~5天换液1次。 |
| 冻存条件： | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验CCC-HPF-1 人胚肺二倍体细胞（自建）CCC-ESF-1 人胚胎皮肤成纤维细胞（自建）HFF 人前皮肤成纤维细胞HFSF 人胚胎眼巩膜成纤维细胞HFTF 人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞HK-2 人肾小球上皮细胞HKC 人胚肾上皮细胞HSF 人皮肤成纤维细胞MRC-5 人胚肺成纤维细胞WISH 人羊膜细胞CCC-HEL-1 人胚胎肝正常细胞(自建)CCC-HEK-1 人胚胎肾正常细胞(自建)CCC-HHM-2 人胚胎心肌组织来源细胞(自建)CCC-HPE-2 人胚
, 0. 1mM 苯甲基磺酰氟(DMSF ) , 5mM B2巯基乙醇, 0. 5% CHA P s(Pierce) 和10% 甘油。 (3)冰育30 分, 然后在超速离心机中离心30 分钟。 (4)去上清, 液氮速冻沉淀, 裂解细胞于-80℃保存。 二、扩增 (1)在微量管中冻干0. 1ug 荧光标记的cx反转引物, 蜡封(5′CCC TTA CCC TTA CCC TTA CCC TTA 3′)。 (2)于蜡界之上加50ul TRA P 反应物, 包括T ris-Cl (pH8. 3) 20
min孵育后，PBS洗涤，FACS固定液200μl加入每管，4℃保存用于流式细胞仪检测。 方法2、特异性的PCR引物（北京戴诺生物技术有限公司，电话：010-67806708转204）进行PCR(PCR-SSP)应该也可以进行测定，比较简单些，以下为参考： 引物： 上游引物：5’-CCT CGT CCC CAG GCT CT-3’ 下游引物：5’-CCC CTG GTA CCC GT-3’ 产物
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