- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC837
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
95d-nc细胞
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | 95d-nc |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-2392 |
| 中文名称： | 人高转移肺癌细胞 |
| 种属来源： | 人 |
| 组织来源： | 肺腺 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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文献和实验后的 VF3-T 细胞体内抗肿瘤作用，1×107 的肺癌细胞系 95D 注射到 B-NDG 小鼠皮下右侧， 移植 7 天后，尾静脉注射 TCR-T 细胞，随后连续 5 天每天腹腔注射 50,000 IU 的 IL2，发现改造后的 TCR-T 细胞明细抑制了肿瘤细胞增长，而且浸润到肿瘤细胞周围，证明了高亲和力的 TCR-T 细胞治疗产品对肿瘤的抑制作用[7]。图 9：改造后的 VF3-T 细胞体内抗肿瘤作用[7]
miR-21-5p 的水平，数据显示，电转后外泌体中 miR-21-5p 的水平显著高于共孵育后 miR-21-5p 的水平。 图三 qPCR检测外泌体中 miR-21-5p 含量 3)从转染的荧光结果来看，相比空细胞组，外泌体电转 mimic NC 后转染入目的细胞中的荧光强度要明显高于外泌体与 mimic NC 共孵育后在目的细胞中的荧光强度，故 mimics 通过电转进入外泌体的效率要远高于通过共孵育进入外泌体的效率。 图四 外泌体电转和共孵育转染荧光对比 4)从检测目的细胞中 miR
（pH6.8） 1.5 mol/L Tris•HCl（pH8.8） 10% SDS 10% 过硫酸胺（APS） 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶（分离胶）浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织
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