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3916细胞培养板康宁96孔黑色培养板
Corning微孔板表面处理
多聚-D-赖氨酸涂层表面:
康宁多聚-D-赖氨酸(PDL)微孔板运用独特的方法涂覆PDL(分子量范围是70到150 kDa)。这种合成的聚合物可以在塑料表面上产生均匀的净正电荷,对于某些类型的细胞而言,这样可以增强细胞吸附、生长和分化,尤其是在无血清和低血清的条件下。PDL表面通常可以改善原代神经元、胶质细胞、神经母细胞瘤,以及包括HEK-293在内的各种转染细胞系的吸附和生长。
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文献和实验这段做MTT走了不少弯路,后来看了园子里有许许多多的建议和指导,再做时结果好了很多,心里很是感激,于是把众多的帖子进行了总结,希望对后来者有所帮助!同时感谢各位前辈的良帖!!MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满
相比线性范围更宽,灵敏度更高; CCK-8细胞活性检测试剂无需预制,即开即用。 四、实验操作指南 1.96孔板每孔加入细胞100 μL(留2个空白组不加细胞,加入同体积的培养基)。细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 注:A、通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。 B、培养温度与细胞类型有关,一般哺乳动物细胞建议37°C
一、实验前应明确的问题 1. 选择适当的细胞接种浓度。 一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。 2. 药物浓度的设定。 一定要多看文献,参考别人的结果再定
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