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文献和实验-17AC CO2 培养箱 SANYOXTD-10A体视显微镜 芜湖光学仪器厂无菌超净工作台 苏州净化设备厂50ml 细胞培养瓶 NUNC96孔细胞培养板 NUNC24孔细胞培养板 NUNC6 孔细胞培养板 NUNC倒置显微镜 LeicaOLYMPUS荧光显微镜 OLYMPUSOLYMPUS光学显微镜 OLYMPUS方法: 神经干细胞的培养 ①原代细胞的培养:取孕13.5天昆明种二级孕小鼠,引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜,取出子宫,放入盛有D1
不动,类器官会沉到管底)。 ④确保溶液均匀分布后,用类器官悬液预润管路,直至溶液完全通过管路。 ⑤启动程序,将类器官溶液分配至黑底/透明底超低吸附384孔细胞培养板中。我们的设置为384孔细胞培养板格式,每孔40μl。 关键提示:预润完成后应尽快启动程序,否则类器官会沉到管底,导致在培养板上的分配不均匀。为确保类器官均匀分布,分配过程中可用血清移液管上下吹打类器官储备液,但需注意不要在分液仪管路中引入空气。 故障排除 ①若选择GR指标作为活力测量方法,需在第3天测定未处理细胞的细胞
/F12(Gibco)、磷酸盐缓冲盐水(PBS;Gibco)、Krebs-Ringer缓冲液。 ③筛网:70μm尼龙细胞筛网(Falcon)。 ④组织培养板:6孔或24孔板(Corning),需要悬浮培养时使用超低吸附板。 ⑤基质胶:生长因子减少型基质胶(Corning)、培养因子混合物。 ⑥其他用品:无菌移液器吸头、离心管、用于处理粘性试剂的低吸附移液器吸头,以及用于活力评估的细胞计数板或自动细胞计数器。 2.方法 a)组织取样和储存:从供体器官、组织切除或活检中收集肝脏组织样本,置于无菌PBS/DMEM
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