链霉亲和素包被微孔板说明书

链霉亲和素包被微孔板

1.产品简介：

本产品采用福因德生物共价包被技术，使链酶亲和素( Streptavidin，SA)高密度定向共价偶联到酶标板微孔内，排列均匀，稳定性高，不易脱落，这种板称为SA Bioconjugate微孔板。此微孔板的Biotin最大结合量达到每孔5pmol，使用Biotin-IgG(Rabbit)的最低检测限低至0.5 ng。

本产品可广泛用于免疫沉淀、免疫检测(ELISA)及各类蛋白质杂交反应。

2.产品信息：

1）灵敏度：0.5ng/well（Rabbit Biotin-IgG）

2）包被体积：100uL

3）Biotin最大结合量：5pmol/well

4）保存条件：短期内可2-8度保存，长期使用请放置-20保存（2年左右）

5)运输条件：蓝冰运输

3.产品应用范围：

1）免疫检测（ELISA）：酶标板可特异性地结合Biotin标记蛋白（抗原、抗体），可广泛应用于夹心法、竟争法或间接法ELISA实验。

2）DNA-蛋白质相互作用研究实验：酶标板可特异性地结合Biotin标记的靶点DNA片段，可用于分析基因表达调控中蛋白因子的作用位点，或者DNA结合蛋白的研究。

4.操作步骤：（参考实施例）

（说明书提供夹心法ELISA的操作步骤，仅供参考。建议使用前每孔加入200ul PBST缓冲液或体系中使用到的其他洗涤缓冲液清洗1-2遍）

1）试剂准备(试剂需客户自备)

(1)PBS-T： 10 mM NaH2PO4，1 mM KH2PO4，137 mM NaCl， 3 mM KCl，0.05% Tween-20，pH7.4；

(2)生物素标记的抗体(捕获抗体) ；

(3)酶标记或其他信号分子标记的抗体(检测抗体)；

(4)牛血清白蛋白(BSA)。

2）生物素标记抗体与包被板的结合反应

(1)抗体的稀释：用PBS-T将生物素标记抗体稀释至1 ug/mL，置于冰上备用。

(2)抗体结合反应：向微孔中加入100uL稀释后的生物素标记抗体，将微孔板放置于水平摇床上室温振荡孵育1~2h。

(3)洗涤:尽量吸去微孔中的液体，再加入200uL PBS-T，将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min，吸去微孔中的液体。重复此洗涤步骤3~5次。

3）封闭（此步骤可省略）

(1)封闭：向微孔加入100uL含5% BSA的PBS-T，将微孔板放置于水平摇床上室温振荡孵育1 h。

(2)洗涤：尽量吸去微孔中的液体，再加入200uL PBS-T，将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min，吸去微孔中的液体上清液。重复此洗涤步骤3~5次。

4）待测抗原的捕获反应

(1)抗原样品的稀释：用PBS-T对含有待测抗原的样品进行稀释。ELISA的检测范围约为0.1~200ng/mL(视所用抗体-抗原配对的亲和力的不同而有所不同)，请根据样品中待测抗原的含量进行若干个不同倍数的稀释。

(2)抗原的捕获：向微孔中加入稀释后的抗原100uL，将微孔板放置于水平摇床上室温振荡孵育1~3 h(或4℃静置孵育过夜)。

(3)洗涤：尽量吸去微孔中的液体，加入200uL PBS-T，将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min，吸去微孔中的液体。重复此洗濠步骤3~5次。

5）抗体检测反应

(1)酶标检测抗体的稀释：用含5%BSA的PBS-T对酶标检测抗体进行稀释，稀释的倍数请参考酶标抗体的相关使用说明。

(2)检测抗体与抗原的结合：向微孔中加入稀释后的检测抗体100uL，将微孔板放置于水平摇床上振荡孵育1h。

(3)洗涤:尽量吸去微孔中的液体，加入200uL PBS-T，将微孔板放置于水平摇床上振荡5 min，吸去微孔中的液体。重复此洗濠步骤3~5次。

(4)显色：请根据酶标抗体的使用说明进行显色反应，并在酶标仪上读取对应的显色结果。

注意事项

1）本产品长期使用需置于零下20℃保存，开封后的微孔板应注意避光干燥保存。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

*本试剂仅供实验室研究使用