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57
- 英文名:
Red Blood Cell Lysis Buffer
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100mL
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
中文名称:红细胞裂解液
英文名称:Red Blood Cell Lysis Buffer
产品规格:100mL
发货周期:1~3天
本产品采用了一种简便易行的方式,经配方优化保证既不破坏白细胞又能充分的将红细胞裂解去除,适用于人,大小鼠等哺乳动物新鲜血液。通常情况下,可以获得血液样品中全部白细胞的 80% 以上并充分保证白细胞的生物活性。
本产品主要成分是氯化铵,即用型溶液,能快速、有效的裂解红细胞,富集分离白细胞。获得的白细胞生物活性好,可直接应用于流式细胞术,核酸或蛋白的提取,PCR等下游实验。
操作步骤
使用前先将低温保存红细胞裂解液平衡至室温。然后在血液样品中加入3倍体积红细胞裂解液 (例如,300 μl血液加入900 μl红细胞裂解液),颠倒混匀,室温放置5min,期间再颠倒混匀几次 ,10000rpm离心1min (若是离心机最高转速不允许,可以3000rpm离心5min),吸去上清。用适当的缓冲液(如PBS, pH 7.2~7.4)清洗一遍。离心后留下白细胞沉淀进行后续的操作。
注意事项
1)本试剂适用于从 1μl 到 10ml 的血液样品中分离白细胞,获得的白细胞可进行下游实验。
2)为了提取到最佳的核酸或蛋白,请使用新鲜血液或保存时间低于 7 天的血液。如产生血凝块,将其去除。尽量采用抗凝管采集样本。
3)通常情况下,血液样品与红细胞裂解液按 1 : 3 比例裂解,对一些特殊病例如白血病、红细胞增多症等,建议采用 1 : 4 或更高比例以保证结果。
4)本品重要成分是氯化铵,不能保证有效裂解有核红细胞,如鸟类,爬行动物、鱼类等血液中的红细胞。
5)本品也可用于哺乳动物组织中红细胞的裂解。
储存条件:2-8℃
注意事项:
红细胞裂解液 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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文献和实验bbdeng 有没有红细胞裂解液的配方?本人试了碧云天的红细胞裂解液,效果不大好,请高人指点! dnazyme http://baike.baidu.com/view/2601370.htm http://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.html COMPOSITION
红细胞裂解液(Tris-NH4Cl):称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌,4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后,混匀静止4-5分钟,待红细胞完全破碎,1000r/min离心5分钟,弃上清去除红细胞,得到白细胞沉淀。 结果第一次用的时候,觉得还可以,第二次和第三次用的时候离心后发现有絮状物质,不能很好的沉淀出白细胞
配制试剂所需材料: 1. Ammonium Chloride 10x Lysing Concentrate Solution a) NH4Cl 80 g b) KHCO3 10 g c) Na2EDTA 3.7 g d) Distilled H2O 1000 mL 2. 1N HCl or 1N NaOH(调节pH
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