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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
Alkaline Phosphatase Immunohistochemistry Kit (Rat)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
100次|500次|1000次
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
中文名称:AP免疫组织化学试剂盒(大鼠)
英文名称:Alkaline Phosphatase Immunohistochemistry Kit (Rat)
产品规格:100次|500次|1000次
发货周期:1~3天
储存条件:冷藏(2-8℃)
概述
AP免疫组织化学试剂盒系列用于细胞或组织切片的免疫组织化学染色。本试剂盒的检测原理为,AP标记的IgG与组织切片上的一抗结合,再加入BCIP/NBT显色液,在AP的催化下,BCIP会被水解产生强反应性的产物,该产物会和NBT发生反应,在组织切片上形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
特点
由于本试剂盒不再使用生物素,从而可以避免可能由生物素引起的非特异性背景显色,使得显色背景更清晰,阳性结果更特异。本试剂盒操作简便,适用于进行大批量切片免疫组化染色。
应用
本试剂盒适用于石蜡切片、冰冻切片和细胞涂片。
组份
内源性碱性酸酶阻断剂;封闭液;AP标记的山羊抗大鼠IgG;BCIP溶液(20X);NBT溶液(20X);碱性酸酶显色缓冲液
注意事项:
AP免疫组织化学试剂盒(大鼠) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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文献和实验免疫组织化学对照实验 由于影响免疫组织化学染色结果的因素甚多,染色中必须有对照实验,否则不可能正确评价染色结果。对照实验包括阴性对照、阳性对照和自身对照。在实践中可用染色组织切片中不含抗原的组织作为阴性对照.而用含抗原的正常组织 作阳性对照,这种自身对照具有节约的意义。观察染色结果时,先观察对照组织的结果,如阳性对照组织中阳性细胞呈强阳性,阴性对照细胞呈阴性,内源酶阴性,背景无非特异性染色时,表明本次实验的全部试剂和全过程技术操作准确无误,待检组织中的阳性细胞具有可信
冰冻切片免疫组织化学染色 1.新鲜组织或在-80℃保存的组织用恒冷箱冰冻切片机切片,厚度为10~40gm; 2.将切片裱于载玻片上,立即用电吹风吹干或室温放置30分钟,如不能及时染色,密封后一20℃保存; 3.染色前组织切片用冷丙酮4℃固定10―20分钟,PBS洗2次,每次5分钟; 4。必要时应用0.1%枸橼酸钠与0.1%Triton X―100的混合液将细胞膜打孔。 其余步骤同石蜡切片。SABC法染色,DAB显色大鼠小肠腺细胞核呈棕色为BrdU免疫
免疫组织化学基本原理 直接法 直接法用酶或其他标记物标记的特异性抗体直接与标本中的相应抗原结合,再与酶的底物作用产生有色产物,沉积在抗原抗体反应的部位,即可对抗原进行定性、定位以至定量研究。直接法简便、快速且特异性强,非特异性背景反应低;其缺点是每种抗原必须分别用酶标记的特异性抗体,故很难获得各种市售标记特异性抗体。直接法敏感性较低,对组织或细胞内抗原量少的样品。难以达到检测目的。 免疫纽织化学直接法与间接法示意圈 三、间接法 第一抗体 不标记,使用
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