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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
200μL×5
支原体清除剂
Mycoplasma Treatment
本产品冰袋运输;4℃保存,保质期6个月;-20℃保存,保质期18个月。
货号规格
goodCX402L 200 μL
goodCX402L 200 μL×5
产品简介
good支原体清除剂的主要成分为抗菌肽(AMPs)+穿膜肽(CPPs),主要用于清除细胞、血清、培养基中的支原体,同时对常见的细菌也有一定的清除作用。其作用原理是支原体清除剂中的AMPs可以有效杀灭细胞外面的支原体和常见细菌,而CPPs可以携带AMPs进入细胞,清除细胞体内的支原体。本支原体清除剂能够清除大部分种类的支原体,而对细胞本身无毒,已经在上百种的细胞上做过验证,如:小鼠胚胎干细胞或iPS细胞、人胚胎干细胞或iPS细胞、HEK293、Hela、HepG2、HCT116、COS-7、Vero、Huh-7、MDCK、PANC-1、SW620、U2OS、MCF-7、MRC-5、NIH-3T3、CCC-ESF、CHO-S、CHO-K1、CHO-DG44、H295R、HL60、K562、MDA-MB-231、SP20、T47D、BM和BV2等。
操作说明
good1. 收货后,请将试剂管瞬时离心(3000 rpm,3~5 s)后保存;
good2. 使用 支原体清除剂 处理时,需确保细胞密度在50~60%;
good3. 弃去旧的培养基,用PBS将细胞清洗干净,再加入新鲜的含有 支原体清除剂 的培养基(推荐稀释比例为1:1000,例如:1 mL培养基需加入1 μL 支原体清除剂 。若细胞污染非常严重,细胞状态不佳,建议以1:500的比例使用,并适当延长处理时间);
good4. 培养1天再重复步骤3,共需要连续处理3~6次,即可完全清除支原体污染。
注意事项
good1. 本品与抗生素有拮抗作用,因此不得与抗生素混用;
good2. 分装储存,务必现配现用;
good3. 因本产品属于蛋白类产品,若部分细胞对本产品敏感,建议使用本品处理2天,然后换用无本品的培养基处理1~2天,重复此步骤处理3~4个周期即可;
good4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good5. 本产品仅限科研使用。
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文献和实验网友eming43的经验 支原体的检测. PCR法 原理 该法是通过PCR技术将支原体16srRNA基因特异性扩增,来检测培养细胞中污染的支原体。PCR引物选自16sr RNA基因上的支原体特异片段,此片段与其他细菌的序列无交叉性杂交反应。扩增产物用琼脂糖凝胶电泳,经溴乙啶(EB)染色后在紫外透射仪上进行检测。 u 16sr DNA引物用水稀释至40umol/L。 (1).正向引物:5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAGTA-3’ (2).反向
污染测试--支原体 : PCR方法原理: 利用具特殊专一性之primers,经由PCR反应来复制mycoplasma DNA。所用之primers来自mycoplasma之conserved 16S-23S rRNA序列,由于此段spacer之序列依mycoplsma种类不同而不同,因此可依所复制之DNA大小及其restriction fragment大小差异来作侦测与鉴定。 特点:灵敏(e.g. 0.1~1.6 CFU / 5 ul sample) 与快速(一天)。可侦测不易培养
颗粒位于细胞表面和细胞之间。 ②荧光染色法:荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258,可使支原体内含有的DNA着色,染色后用荧光显微镜观察。具体方法如下:首先将细胞接种盖玻片上,在细胞未长满前取出玻片,用不合酚红的Hanks液漂洗一下,用l: 3醋酸甲酵固定10Min,然后用生理盐水漂洗。置于用生理盐水配浓度为50pg/ml的Hoechst 33258中染色10min。染色后用蒸溜水洗1—2min。向细胞面滴加pH5.5磷酸缓冲液数滴,然后置荧光显微镜下观察。镜下支原体












