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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
有
- 供应商:
Arcegen
- 英文名:
DfCell 1000×Mycoplasma Prevention Reagent
- 规格:
100μL/1mL/5×1mL
| 规格: | 100μL | 产品价格: | ¥150.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1mL | 产品价格: | ¥450.0 |
| 规格: | 5×1mL | 产品价格: | ¥1400.0 |
产品简介
在细胞培养过程中,定期检测能够有效的避免支原体污染,但如果细胞已受支原体污染,则需对其进行及时处理,最佳处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。若受污染的细胞比较珍贵,则必须去除支原体污染。由于支原体无细胞壁,因此传统的抗生素一般对其无效。本产品是一种经过改良的专门用于支原体去除的混合制剂,可通过抑制DNA 和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清除效果,且对细胞无伤害,尽量挽救您珍贵的细胞,减少因支原体污染带来的损失。
产品规格
| 货号 | C230102S/C230102M |
| 规格 | 1 mL/5×1 mL |
产品储存
冰袋运输。
-20℃避光保存,保质期 18 个月。若较长时间不用,请避光保存。
操作注意
1.在使用本试剂前,请仔细阅读说明书。
2. 在整个实验过程中应遵循标准化操作,包括反应体系的制备、样品处理以及加样操作。
3. 为了你的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
4. 仅用于研究目的。
操作说明
1.使用前,确保瓶盖密封,将溶液解冻至室温,轻轻涡旋混匀,并在将其放入层流罩前用 70% 乙醇擦拭瓶子表面。
2.使用 DfCell 试剂处理细胞时请遵循以下说明。
3.受污染的细胞分盘后,向 10 毫升培养基中加入 10 微升 DfCell 试剂溶液并培养 7 天。在此期间,更换培养基时按相同比例加入 DfCell 试剂。
4.细胞培养 7 天后,换成不含支原体清除试剂的培养基培养 2 天。取 10 微升细胞培养上清液进行支原体检测,以评估清除效果。
【注意】
a. 由于不同细胞对本产品的耐受性不同(在大多数情况下,细胞毒性很低),如果在使用过程中该产品对细胞表现出毒性或使细胞生长变慢,可以按 1:2000 的比例稀释后使用。
b. 如果支原体污染严重,使用清除试剂处理 7 天不能完全清除支原体,则可以适当延长处理时间。
c. 处理后,建议使用 DfCell 支原体 LAMP 检测试剂盒(货号 C230105)或 DfCell 支原体 RT-qPCR 检测试剂盒(C230106)来评估去除效果。
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文献和实验污染不除,实验结果势必或多或少产生偏差,故进行实验前,确定细胞为mycoplasma-free至关重要,实验结果之数据才有意义。 支原体污染一般来源于血清,实验仪器、培养基或其他试剂蔓延开来。怎样预防和去除支原体污染呢?一般只有三种抗生素(四环素,大环内脂和喹诺酮)能有效对付支原体。在低浓度时,这些抗生素不会产生耐药性,且对哺乳动物细胞的毒性较小。四环素和大环内酯能结合30S和50S核糖体亚基,从而抑制蛋白质合成,喹诺酮抑制DNA旋转酶。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制
℃下将收集的血浆分装保存,避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。常见的抗凝剂包括EDTA钠盐,肝素钠,枸橼酸钠等。检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书,查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。 细胞培养上清 将细胞培养上清液吸入离心管中,在2-8℃下以1000×g离心20分钟,除去细胞碎片和杂质,收集上清液备用,样本保存在-20℃或-80℃,避免反复冻融。 细胞提取液 反复冻融方法 1) 吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮
看了以后也总说没关系,因此一直没在这事上下工夫,细胞长得太糟我就用D-Hanks洗两次,然后用酶消化后用灭菌的离心管洗细胞、1000rpm离心,三次,同时用D-Hanks洗两次培养瓶,重新贴壁,似乎也有一点点效果。但这个学期要用的几种细胞中有的过了两个星期也长不起来,长起来的细胞周围也有很多沙子样的小黑点,全实验室所有养了细胞的都说自己的细胞长得差,负责细胞房工作的老师复苏了一次又一次,这方面的问题还是没有人着手解决,我急了,查了支原体方面的文献,有些文章比较麻烦,注射到小鼠体内来杀灭支原体,至少
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