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- 2026年01月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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32
- 英文名：
SABC KitPOD(Mouse IgG)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
-20℃如经常使用将封闭液3% H2O2和20×DAB显色液B存放于2～8℃以方便使用
- 规格：
100T200T
中文名称：免疫组化检测试剂盒(POD显色)(小鼠IgG)
英文名称：SABC Kit-POD(Mouse IgG)
产品规格：100T-200T
发货周期：1～3天
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验DAB显色。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，因此基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
保存条件：-20℃，如经常使用，可将封闭液，3% H2O2和20×DAB显色液B存放于2～8℃以方便使用。
操作步骤（以石蜡切片为例）：
1．切片常规脱蜡至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2．3% H2O2室温处理5～10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3．可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾 后断电，间隔5～10分钟后，反复1～2次。冷却后PBS（pH7.2～7.6）洗涤1～2次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃ 10分钟，PBS（pH7.2～7.4）洗涤2～3次。
c、跳过此步，直接进入下一步。
4．滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
5．用稀释液将一抗按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右，也可4℃过夜。PBS（pH7.2～7.4）洗涤3次，每次2分钟。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间）。
6．根据用量，用稀释液将Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10μl Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠IgG工作液,20～37℃孵育30分钟。PBS（pH7.2～7.4）洗涤3次，每次2分钟。
7．根据使用量，用稀释液将 SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10μl SABC-POD 浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20～37℃，30分钟。PBS（pH7.2～7.4）洗涤4次，每次5分钟。
8．DAB显色:根据用量，用PBS（pH7.2～7.4）配制，按1ml PBS加入50μl 20×DAB显色液A，加入50μl 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在 5～30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5% Triton X-100室温孵育20分钟，PBS漂洗两次，3% H2O2处理15分钟；PBS漂洗两次，接上述第4步。
对于冰冻切片，固定后，PBS漂洗两次，接上述第二步。
注意事项：
如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01～0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2～7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
注意事项：
免疫组化检测试剂盒(POD显色)(小鼠IgG) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(学发光免疫分析法) Chicken (Gallus)
免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(学发光免疫分析法) Cavia (Guinea pig )
免疫球蛋白G(IgG)检测试剂盒(学发光免疫分析法) Homo sapiens (Human)
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NAT10酰转移酶10抗体ELISAKitforLymphotoxinBeta(LTb)
LevodopaNEK7丝/苏蛋白激酶Nek7抗体ELISAKitforInterferonRegulatoryFactor1(IRF1)
GGCXγ-谷酰羧化酶抗体ELISAKitforGlycosylationDependentCellAdhesionMolecule1(GlyCAM1)
LevofloxacinFactorVIIlightchain凝血子VIIELISAKitforPlateletFactor4Variant1(PF4V1)
MyosinVIIa/DFNB2肌球蛋白7a/常染色体隐性耳聋蛋白2抗体ELISAKitforInterferonOmega(IFNw)
FactorX凝血子10抗体ELISAKitforGranulocyteChemotacticProtein2(GCP2)
LevomenolNIR2膜脂转移蛋白1抗体ELISAKitforReceptorIForTheFcRegionOfImmunoglobulinG(FcgRI)
英文名称：SABC Kit-POD(Mouse IgG)
产品规格：100T-200T
发货周期：1～3天
本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验DAB显色。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质(PI=10)，经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，因此基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex，SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
保存条件：-20℃，如经常使用，可将封闭液，3% H2O2和20×DAB显色液B存放于2～8℃以方便使用。
操作步骤（以石蜡切片为例）：
1．切片常规脱蜡至水(三次二甲苯，三次乙醇)。
2．3% H2O2室温处理5～10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3．可选步聚：
a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾 后断电，间隔5～10分钟后，反复1～2次。冷却后PBS（pH7.2～7.6）洗涤1～2次。
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6．根据用量，用稀释液将Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10μl Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠IgG工作液,20～37℃孵育30分钟。PBS（pH7.2～7.4）洗涤3次，每次2分钟。
7．根据使用量，用稀释液将 SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10μl SABC-POD 浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-POD工作液,20～37℃，30分钟。PBS（pH7.2～7.4）洗涤4次，每次5分钟。
8．DAB显色:根据用量，用PBS（pH7.2～7.4）配制，按1ml PBS加入50μl 20×DAB显色液A，加入50μl 20×DAB显色液B 。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在 5～30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
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注意事项：
如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01～0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2～7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。
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细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
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⑤细胞分化及其调控。
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1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
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3.研究的样本可以达到比较均一性
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文献和实验相关实验
2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到最佳结果。 注意：荧光在一段时间后会越来越弱。 2.DAB显色 DAB（3,3二氨基联苯胺）和HRP反应产生棕色的不溶终产物。这种棕色沉淀不溶于酒精和其它有机溶剂，对于必需使用传统复染和封固介质的免疫组化染色应用特别理想。 对于AP标记的二抗我们选用BCIP
（1）DAB显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗； （2）DAB显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短你的抗 体孵育时间； （3）此外，若很短时间就出现背景很深，还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长封闭时间； （4）DAB显色时间很长（如超过十几分钟）才出现
5、切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长（大于 24 h）：原因上不清楚，但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复，第二天加抗体进行免疫组化染色，如果将装有切片和修复液的容器放在 4ºC 冰箱过夜，对结果无明显影响，如果放在室温，特别是炎热的夏天，会出现背景着色，因此，不可存放时间太长。 6、一抗变质、质量差的多克隆抗体：注意抗体的有效期，过期的抗体要么不显色要么背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。
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