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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
34
- 英文名:
Streptavidin/AF750
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
详见说明书
- 规格:
瓶
| 产品名称 | 荧光素Alexa Fluor 750标记链霉亲和素规格 |
| 英文名称 | Streptavidin/AF750 |
| 货号 | YS-D10167 |
英文名称: Streptavidin/AF750
应用: ICC=1:500-5W;IF=1:500-5W;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 1mg/ml
使用方法:
1. 对于培养细胞样品
(1) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF (CAT:AP02L014),使PMSF的终浓度为1 mM。
(2) 细胞裂解
对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1~2 s后,细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞加入150~250 μL裂解液的比例加入裂解液,混匀,充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。
(3) 充分裂解后,10000~14000 rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2. 对于组织样品
(1) 把组织剪切成细小的碎片;
(2) 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1 mM;
(3) 按照每20 mg组织加入150-250 μL裂解液的比例加入裂解液。如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量,具体RIPA裂解液的使用量参照表2。
(4) 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
(5) 充分裂解后,10000~14000rpm离心3~5 min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事项:
1、本试剂为强烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同时,也会将基因组一并释放出来,造成细胞裂解液粘稠,此时可以直接加入蛋白上样缓冲液,煮沸再离心,离心后直接上样电泳;若想测定浓度,可入加少量SDS(1%),煮沸后离心测浓度。本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂,所以不适合使用Bradford蛋白浓度测定试剂盒,请选择BCA法或者Lowry法检测蛋白浓度。
2、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物,随后离心取上清用于后续实验。
下列是荧光素Alexa Fluor 750标记链霉亲和素规格的相关产品:
2mgstreptomycin/BSA链霉素偶联牛血清白蛋白小鼠P53(P53)ELISA试剂盒原装、分装含量测定
10mgstreptomycin/OVA链霉素偶联鸡卵白蛋白小鼠环-磷鸟苷(cGMP)原装、分装含量测定
10mgMetronidazole/OVA硝唑偶联鸡卵白蛋白小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)原装、分装含量测定
10mgMetronidazole/BSA硝唑偶联牛血清白蛋白小鼠血小板活化因子(PAF)原装、分装含量测定
5mgMorphine/KLH吗与血蓝蛋白偶联物小鼠心肌转录因9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)ELISA Kit,48T/96T
沃塔紫杉醇PHGDH 磷甘油脱酶抗体Gastrodin
Annonacin小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit,48T/96T ,
脱雌马酚PASK/STK39 丝氨/苏氨蛋白激酶39抗体Ursolic acid
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山梗
荧光素Alexa Fluor 750标记链霉亲和素规格葡钠()质量含量测定4FLUOROCINNAMONITRILE
克拉维英文名称对照品支
异常汉逊酵母Hansenulaanomala婴儿双歧杆Bifidobacteriuminfantis
青英文名称对照品支
羟()质量检查Hydroxylammoniumchloride
2-酰英文名称标准试剂支
7-苄氧基-N-des{[2-(2-羟基)氧基]基...C21H22O4人酪氨羟化酶(TH)ELISAKit
7-差向10-去酰基紫衫醇C24H36O5人酪氨激酶2(Tyk-2)ELISAKit
7-差向紫杉酚
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