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过表达/干扰RNAi慢病毒包装服务

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  • ¥2800 - 12000
  • 专业的病毒包装服务
  • 上海
  • 2025年11月10日
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      Hanbio汉恒生物

    • 服务名称

      慢病毒包装

    • 规格

      1ml

    产品简介

           慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。具有感染谱广泛、可以有效感染分裂期和静止期细胞、长期稳定表达外源基因等优点,因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中。


    慢病毒特点:

    ● 感染范围广

      慢病毒可有效感染分裂和非分裂细胞,适合几乎所有细胞系,如神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等。

    ● 可稳定表达

      慢病毒可将外源基因整合到宿主细胞基因组上,不随着细胞的分裂传代而丢失,可实现目的基因的长时间稳定表达。

    ● 操作安全性高

      慢病毒采用的是自失活复制缺陷型病毒株,保障操作安全


    汉恒服务项目

    ● 常规基因过表达/干扰慢病毒包装

    ● miRNA sponge/antago慢病毒

    ● circRNA /LncRNA过表达和干扰慢病毒

    ● CRISPR/Cas9慢病毒定制

    ● 慢病毒现货

    ● 慢病毒稳定细胞株

     

     

    整体实验流程

     

    (一) 实验流程(1、2、3为并列步骤)

     

          1. 慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物,同时引入酶切位点,采用PCR技术(采用高保真KOD酶,3K内突变率为0%)从模板中(cDNA质粒或者文库)调取目的基因CDS区(coding sequence)连入T载体。将CDS区从T载体上切下,装入慢病毒过表达质粒载体。

     

         2. 慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构,退火后连入慢病毒干扰质粒载体。

     

         3. miRNA载体构建从 Genomic 中调取基因相应的Mir 前体, 并在调取引物中引入酶切位点。

     

         4. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化 制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒(两质粒包装系统),三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提,共转染293T细胞,转染后6 h 更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。

     

    (二)流程图

     

     产品细节图片1

     

    提供产品

     

    产品细节图片2

     

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    相关实验
    • 基因递送的多面手:慢病毒载体

      了恶性表型。 代谢组学、蛋白质组学以及 ECAR 和 OCR 测试揭示了 ADPGK 显著加速了 PCa 的糖酵解。 ADPGK 与丙酮酸激酶 C(ALDOC)结合,通过 AMP 激活蛋白激酶(AMPK)磷酸化促进糖酵解。 图 2 用于 ADPGK 过表达病毒结构示意图及 ADPGK 过表达结果。   案例 2:用慢病毒载体递送 RNA 干扰工具,研究脯氨酸羟化酶结构域蛋白在调节心肌细胞钙水平中的功能[2] 由于高氧消耗,心肌细胞对环境中的氧气极为敏感。脯氨酸羟化酶结构域蛋白 2(PHD

    • 做病毒浓缩还在用超高速离心法,太 out 了!

      慢病毒简介慢病毒(Lentivirus)载体是以人类免疫缺陷I型病毒为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。在转染遗传物质到细胞基因组中的工作中,重组慢病毒载体是一个强大和有效的工具,该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染包括几乎所有的哺乳动物细胞、干细胞和原代培养的细胞,目前慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达、RNA干扰、microRNA研究以及活体动物实验中,从而达到

    • 【求助】用过慢病毒载体的请进

      dongxiao1214 各位大虾们,我现在急需慢病毒载体和他的包装载体,谁有的可以卖给我一套吗?我研二了,老板让做这些东西,还只能自己想办法,谁能帮帮我,不胜感激!! dongxiao1214 自己先顶一下,愿意帮忙的可以加我qq 315915365 dongxiao1214 对了,过表达的和RNAi的都可以,如果都有更好,不过我现在希望做的是过表达

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