4-氯-6-碘喹唑啉

放射性碘标记：氯胺T法

　氯胺T法标记效率高、重复性好、试剂便宜易得，是目前使用最多的碘标记方法。 　　 1 ．原理氯氨 —T （ Chloramine--T ）是一种温和的氧化剂，在水溶液中产生次氯酸，可使碘阴离子氧化 成碘分子。这活性碘可取代肽链上酪氨酸苯环上羟基位的一个或两个氢，使之成为含有放射性碘化酪氨酸的多肽链。 　　2．方法以 125 I—AVP的制备为例

做好抗体标记，这4种方法你都用对了吗？

。 5.使用抗体溶液PBS 或其他缓冲液透析，以去除未结合的生物素。由于生物素分子较大，透析比预期的要慢，或使用蛋白质A或蛋白G层析柱再次纯化抗体。 6.标记抗体按纯化抗体的储存方法保存。   放射性碘标记抗体 蛋白质的碘标记方法有很多种，比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。 操作步骤 1.在碘标记前，准备氯甘脲包试管（2支6mm碱性玻璃管或1.5ml锥形试管)。氯甘脲溶于浓度0.5μg/ml的氯仿中。然后将其分别加入试管管100μl和20μl。让氯仿在通风柜中挥发

氯胺T法标记蛋白质/多肽注意事项

含还原剂（如Na2 S2 O5 等）量多时，会抵消氯胺T的作用，降低碘利用率，甚至导致标记完全失败。放射性碘源要用无载体的，标记所用全部用具和试剂必须不含碘；只要有极少量的碘的污染，非放射性碘就会稀释放射性碘，使放射性碘利用率显著降低。为了便于放射性防护和除污染，以及减少射线对蛋白质分子的损伤，标记投入的放射碘量不宜过大，一般以 　　（2）放射性碘与多肽、蛋白质用量的比例：这比例对标记结果的影响很大。如上述原因，一般标记时放射性投入量不宜过多，示踪实验室中常规每次只用1～2mCi