- ￥400
- simgen
- 3002050
- 浙江杭州
- 2025年07月15日
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大量
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50次制备
适用于从血液／体液／培养细胞中分离纯化最多达15 µg总DNA（包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA）。
· 20-40分钟内即可完成血液总DNA的制备。
· 经典蛋白酶K消化步骤，适合从多种样品中分离纯化DNA。
· 无须事先分离去除红细胞、酚氯仿抽提及异丙醇沉淀步骤。
· 可从新鲜或者是冷冻的全血 (各种抗凝剂包括 柠檬酸钠，EDTA，肝素)、血浆、血清、骨髓、淋巴细胞、血小板、体液等样品中提取总DNA。
· 核酸纯化柱可最大吸附12 μg 总DNA。
· 起始样品体积：1 µl- 200 µl全血或体液，≤5×106 培养细胞。
· 所获的DNA长度在200 bp -50 kb之间，主要的DNA长度在30 kb左右。
· 可用50-200 μl洗脱液体积洗脱总DNA。
· 彻底清除血样中的PCR抑制物，可使用1-20 µl洗脱的DNA为模板进行扩增。
· 所需仪器：可适合2 ml离心管使用的离心机。
产品原理
全血或体液样品经蛋白酶K消化后，用柱纯化核酸技术过滤除去降解的血红蛋白，吸附在纯化柱上的总DNA经Buffer WA和Buffer WB洗涤后，可彻底清除残留在纯化柱上的杂质及PCR抑制物。纯化柱上的总DNA直接用Buffer TE或水洗脱，并可立即用于各种分子生物学实验。
Simgen 全血DNA小量试剂盒用于HBV病毒的检测效果。
从左至右分别为1×107 copies/ml、1×106 copies/ml、1×105 copies/ml、1×104copies/ml、1×103 copies/ml、1×102 copies/ml全血样品。
方法：1×108 copies/ml HBV阳性血清用人阴性全血依次10倍稀释为1×107 copies/ml、1×106 copies/ml、1×105 copies/ml、1×104 copies/ml、1×103 copies/ml、1×102copies/ml，取200µl稀释的全血用Simgen 全血DNA小量试剂盒纯化总DNA，用100 µl TE溶液洗脱总DNA，取20 µl纯化的总DNA用于PCR检测的效果（PCR检测试剂盒为Acon乙型肝炎病毒定量荧光PCR检测试剂盒）。
6个人血样品用Simgen 全血DNA小量试剂盒提取的基因组DNA效果。
Marker: 1kb ladder，1.0% TAE 琼脂糖凝胶电泳。
操作步骤
在全血中加入蛋白酶K和酶解缓冲液，温育10分钟降解血液中的血红蛋白，加入乙醇调整溶液的柱结合条件，再将溶液加入纯化柱上经过结合、清洗步骤去除残留的杂质后，即可被TE溶液洗脱下来。
适用的分子生物学实验
1． 不同长度的PCR
2． RFLP分析
3． Southern blotting
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文献和实验培养细胞的免疫酶标抗体染色法 免疫酶组织化学技术是以酶作为抗原抗体反应的标记物，酶催化相应的 底物，形成一种不溶性的反应产物。光镜观察时，要求形成的终产物为不溶性的有色沉淀， 而电镜观察时，则要求酶反应的终产物经适当处理后，具有较高的电子密度。辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)是目前应用最多的酶标记物，具有稳定性强和酶反应特异性高等优点。 1)0．1mol／LPB(pH 7．2)配制的4％多聚甲醛原位固定(4℃
球蛋白：3.8（3.5～4.1）g／dl 钙：9.8～10.6mg／dl 钠：335～370mg／dl 清蛋白：1.6～1.7g／dl 全血糖：147～171mg／dl 钾：30～31mg／dl
的缓冲液再清洗一次。 2. 消化分离 消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。 3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液
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