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PCR Mix-热启动PCR预
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2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (With Dye)
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2年
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
冰袋运输。-20℃保存
1 mL
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格(元)
10732ES01
100μl
0
10732ES03
96.00
10732ES08
5×1ml
432
产品描述
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase是Hieff UNICON® Taq抗体和Hieff® Taq DNA Polymerase的混合产品。Hieff UNICON® Taq抗体与Hieff® Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30 min,依旧可以封闭Hieff® Taq DNA Polymerase的活性。Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase在预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。
预混液中已加入电泳缓冲液和染料,使得PCR产物可以直接进行电泳,染料的存在不会干扰扩增效率。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。
产品应用
低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。2)本产品仅作科研用途!
PCR反应体系(50 μL)
组分
体积
终浓度
ddH2O
to 50 μL
-
模板DNA
适量
Primer正向 (10 μM)
2 μL
0.4 μM
Primer反向 (10 μM)
25 μL
1×
【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。
模板种类
模板使用量
基因组DNA
50 ng-200 ng
质粒DNA
100 pg-20 ng
cDNA
1-5 μL (不超过反应体系的1/10)
PCR扩增程序
循环步骤
温度
时间
循环数
预变性
95℃
5 min
1
变性
30 sec
35
退火
50-60℃
延伸
72℃
30 sec/kb
终延伸
10 min
【注】:1)退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
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货号
2×Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (No dye)
10733ES03
10733ES08
5×1 mL
432.00
HB210831
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