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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
Protease inhibitor Cocktail
- 保质期:
有效期1年
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
31
- 规格:
1ml
蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC) 尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
中文名称:蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC)
英文名称:Protease inhibitor Cocktail
产品规格:1ml
发货周期:1~3天
蛋白酶抑制剂(Protease Inhibitor)是指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合,使蛋白酶活力下降甚至消失但不使酶蛋白变性的物质。蛋白酶抑制剂有很多种,包括EDTA、E-64、NaVO3、Bestatin、Leupetin、PepstatinA、Aprotinin等均可有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC)主要由Leupetin、PepstatinA、Aprotinin、E-64等组成,不含EDTA。
该混合物可以抑制绝大多数蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱胺酸蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。
该蛋白酶抑制剂混合液是100×的浓缩的DMSO溶液,适用于从哺乳动物组织、细胞中提取蛋白质,能够更有效的获得目的蛋白质。提取出来的蛋白可以用于Western Blot、免疫共沉淀等试验。
操作步骤(仅供参考):
1.开盖前请低速离心一下,以便将黏附于管壁的液体甩至管底。
2.使用时,根据裂解液的用量加入蛋白酶抑制剂混合液(100×PIC),使其终浓度达到1×。
注意事项:
1.蛋白酶抑制剂混合液有轻微刺激性,小心操作,同时应避免反复冻融。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃避光,有效期1年。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
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(0.6μg/μl 12μl),1 0×PCR缓冲液120μl,Taq DNA聚合酶(5 U/μl)1.2μl,双蒸水756μl; (3) 向竞争模板GM-cSF 1#~11#管中加入90μl上述混合液; (4) PCR进行40个循环,参数为94℃ 1min,62℃ 1min,72℃ 2min; (5) 取反应液各20μl,一式三份,在2.5%琼脂糖凝胶中电泳分析; (6) 测定每管中(gGM)和cGM的含量,以密度计对电泳胶片进行分析测定; (7) GM
问:请教一个实验问题,PMSF,胃酶抑制剂以及DTT会不会影响HRP活性?要做ELISA,样品中不知道可不可以加复合蛋白酶抑制剂?请大牛指教!答:不会影响酶活性,因为蛋白酶抑制剂,抑制的是蛋白水解酶活性。而HRP不是蛋白酶类,而是过氧化酶。(不过dtt肯定会破坏HRP)。即使会影响酶活性,实际上做elisa也不影响,因为加样品和加hrp是分开的,不存在。 答:我在研究各种抑制剂对L-氨基酸氧化酶酶活性的抑制作用的时候,测定L-氨基酸氧化酶活性的体系含有HRP。我们首先用各种抑制剂对HRP水解
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