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产品介绍
产品名称:Rhodamine Phalloidin
中文名称:罗丹明鬼笔环肽
品牌:Cytoskeleton
摩尔质量:1306
外观:粉红色冻干粉末
纯度:> 99%
运输条件:室温
储存条件:冻干粉末在4°C干燥(<10%湿度)下稳定1年。
使用方法:瞬时离心以将产物收集在管的底部。用500 µl 100%甲醇复溶以创建14 µM溶液。 建议将溶液分装成10 x 50 µl,并在-20°C的黑暗环境中保存6个月。
荧光鬼笔环肽Acti-stain™系列,以最经济的价格提供异常明亮且稳定的探针。与领先竞争产品的对比显示,使用Acti-stain™探针,在节省开支的同时保证了染色的质量。
产品背景
鬼笔环肽作为实验室工具的用途已广为人知,并且在于它具有抑制微丝解聚的能力。因此,将鬼笔环肽稳定的微丝用作底物,用于鉴定和表征越来越多的微丝相关蛋白。此外,若丹明鬼笔环肽可用于染色细胞中的肌动蛋白细胞骨架,还可作为用于活力分析的微丝的荧光标记/稳定剂。
产品外观
罗丹明鬼笔环肽为粉红色冻干粉末。摩尔质量为1306。用500 µl甲醇复溶时,浓度为14 µM(200 x储备液)。1×的PHDR1工作液可染色300-350张细胞爬片(22 x 22mm)。
纯度
Cytoskeleton. Inc提供的罗丹明鬼笔环肽的色谱纯度> 99%。这是可用于研究用途的最纯的鬼笔环肽。
生物活性
Cytoskeleton. Inc提供的罗丹明鬼笔环肽的微丝稳定性及特异性更优于其他同类型产品,用70nM 鬼笔环肽标记的F-actin可在室温下稳定保存超过1周。
产品用途
在已固定的细胞中进行F-actin染色
在体外实验中稳定肌动蛋白丝
在体外实验中可视化肌动蛋白丝
应用实例
图1.用若丹明鬼笔环肽(PHDR1)染色的Swiss 3T3成纤维细胞。鬼笔环肽特异性结合肌动蛋白,并将肌动蛋白应力纤维染色
参考文献
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[2]. Gomes, E. R., Jani, S. and Gundersen, G. G. (2005). Nuclear movement regulated by Cdc42, MRCK, myosin, and actin flow establishes MTOC polarization in migrating cells. Cell 121, 451-463.
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[4]. Yuan et al., 2012. Subsecond absolute quantitation of amine metabolites using isobaric tags for discovery of pathway activation in mammalian cells. Anal. Chem. v 84, pp 2892–2899.
[5]. Andersen et al., 2012. Escherichia coli Uropathogenesis In Vitro: Invasion, Cellular Escape, and Secondary Infection Analyzed in a Human Bladder Cell Infection Model. Infect. Immun. v 80, pp 1858-1867.
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文献和实验Rhodamine-Phalloidin/Calcofluor Staining
4 + 2.4 grams KH2PO4. pH upon dilution to 1X should be 7.2. Rhodamine Phalloidin Molecular Probes Inc., Dissolved in methanol according to manufacturers instructions to ~6.6uM and stored dessicated at -20¡C. Cat#R-415. Calcofluor aka
phalloidin (Molecular Probes, Inc. #F-432) in an eppendorf tube. Speedvac off the methanol to dryness. Add 20 ul "S mix" to dissolve the phalloidin, and add this to the dry worms. S mix (1 ml) 743 ul dH20 250 ul 0.8 M Na phosphate pH
Fluorescence Procedures for the Actin and Tubulin Cytoskeleton in Fixed Cells
to final 0.32 M from 4 deg C stock (78% is 7X). Detergents In general Triton-X-100 (TX) is best, but it can sometimes be too harsh for delicate cells. We standardly use TX at a concentration of 0.1-0.5%, but gentler detergents such as saponin
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