甲叉双丙烯xian胺

SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质（图）

一、目的要求1.学习电泳原理和技术。2.学习和掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质技术。二、原理聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺（acrylamide，简称Acr）和交联剂N，N-甲叉双丙烯酰胺（N，N-methylene-bisacylamide，简称Bis）在加速剂N，N，N，N-四甲基乙二胺（N，N，N，N-tetramethyl ethylenedia mine，简称TEMED）和催化剂过硫酸铵[ammonium persulfate（NH4）2S2O8，简称AP）或核黄

植物过氧化物酶同工酶测定

凡能催化同一种化学反应，但其分子结构和带电性质不同的一组酶称同工酶（isoenzyme）。同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的，所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生理生化和遗传问题时，常常要分析同工酶谱的差异。因此，同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。一、原理聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺和交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化剂作用下聚合而成，具有三维网状结构，其网孔大小可由凝胶浓度和交联度加以调节。凝胶电泳兼有电荷效应和分子筛效应。被分离物质由于所载电荷数量、分子大小和形状

SDS-PAGE常用参数

 聚丙烯酰胺的特性，包括机械性能，弹性，透明度，孔径大小取决于T，C，T是两个单体(单体丙烯酰胺和N-N’-甲叉双丙烯酰胺)的总百分浓度，C是与总浓度有关的交联百分比浓度。  T=(a+b)/m C=b/(a+b) （a为单体丙烯酰胺的克数，b为N-N’-甲叉双丙烯酰胺的克数，m为缓冲液终体积） a，b的比例很关键，如果a:b 小于10，胶脆，硬 如果a:b 大于100，胶糊状。 一般有弹性，透明的胶，a:b比例应在30。一般的胶联度是随着T的增加而降低的，在5%-20%交联