丽春红S

印迹膜蛋白染色

一、所需试剂 1. 2%丽春红S浓贮存液（3-羟基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2，7-萘二磺酸）：溶于30%三氯醋酸和30%磺基水杨酸中。贮存液可在室温下稳定存放1年以上。 2. PBS。 二、操作步骤 1. 在染色之前，先配制丽春红S的应用液。即将2%的丽春红S浓贮存液用1%醋酸1:10稀释即成为应用液（注意：如果使用硝酸纤维膜，须将丽春红S应用液更换为用水1:10稀释）； 2. 用丽春红S应用液将PVDF膜洗1次； 3. 加入新鲜稀释的丽春红S应用

转印后切取印迹膜

转印后切取印迹膜       有时转印后需将印迹剪成较小的片状进行单独处理。单个泳道可以泳动同一样品，待彼此分开后，可用不同的抗体并列检测。如以电泳方向剪膜，就可在同一样品中检测不同分子大小的抗原。为了简便而精确地找到泳道，电泳之后用丽春红S（Ponceaus S）或印度墨汁对印迹膜进行染色，便可很快确定待测蛋白质的位置并将其剪下。表表明两种染料的的适用范围及优缺点，用丽春红S染色的优点是操作简便，价廉和具有可逆性，在封闭过程中，染色易消褪，且不干扰进一步的检测

十二 Western印迹鉴定目标蛋白

PBST溶液中； 3.丽春红S（Ponceaus）染液：0.5g 丽春红S溶于1mL 冰乙酸中，加水至100mL； 4.PBST洗膜液： PBS 缓冲液含0.5% Tween 20； 5．DAB浓缩显色液（50X）：DAB（二氨基联苯胺）是根过氧化物酶的底物之一，临用前稀释。 6．5 x PBS( 磷酸缓冲液 )：在1600mL 蒸馏