明胶甘油封片剂

免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项

一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，不同点如下： 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油：0.01M PBS （1：1）。条件许可，建议购买抗淬灭的封片液，使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多，需要分别设定阳性和阴性

大分子物质的水解试验

  实验四十 大分子物质的水解试验   　　一、目的要求 　　证明不同的微生物对复杂有机大分子的水解能力不同，从而说明不同的微生物有不同的酶系统。 　　二、基本原理 　　细菌对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶将大分子物质分解。胞外酶能分泌扩散到细胞外，将物质分解成小单位如糖、氨基酸、甘油与脂肪酸。这些小单位的物质能被细菌吸收和利用。水解过程可通过底物的变化

脂类染色

、苏丹黑B显示脂类物质 （I）、操作方法： 1、福尔马林固定的组织恒冷箱冰冻切片，附贴于载片上或收集于装有蒸馏水的小烧杯中，厚5-10um。 2、50-70%酒精稍洗切片， 3、苏丹黑B染液中染色5-15min， 4、50-70%酒精洗去多余染液， 5、蒸馏水洗， 6、0.1%核固红染细胞核10min， 7、自来水洗10min， 8、擦去切片上多余的水分， 9、甘油明胶或水性封片剂封固。 结果：脂类物质：黑色，细胞核：红色。 （2）试剂的配制： 苏丹黑B（sudan