防脱玻片（多聚赖氨酸处理）

免疫组化中如何防止脱片

听到很多人抱怨，在免疫组化实际操作中遭遇过组织易脱片的问题，今天我将结合一些个人经验，与大家分享简单易操作的解决方法。方法一：使用防脱玻片，组织当然是越新越好。方法二：某些免疫组化染色时候，需要涉及多种抗原修复方法，如某实验需要双修复（热修复和酶修复），热修复相对来说是比较剧烈的（如放在 EDTA 中煮 1 min），沸腾的液体对组织还是有很大的冲击力的，此时组织容易脱，如果热修复放在酶修复后，则组织更容易脱，相反如果将不剧烈的酶修复放在热修复后，可以减少脱片的发生。但很多时候知道这些似乎解决

附录二　原位杂交组织化学常用试剂及处理

开竖放在架子上，于空气中自然干燥，4℃备用。注意：①浸蘸时，务必使整个玻片完全浸于液体中，否则，包被不完全会产生标本脱落现象；②干燥过程中注意避免尘埃污染；③按上法处理的玻片通常可存放在一定时间（室温1月以上，4℃更长），但仍建议尽早使用。 （2）多聚赖氨酸1mg溶于10ml灭菌的去离子水或1mmol/L的Tris-HCl缓冲液中（pH7.0），将其涂布于玻片上，待干燥后即可使用。该法包被的玻片可用于细胞涂片和切片。 （3）将PLL工作液滴至盖玻片上5μl/片，用另一盖玻片以推血

pc12培养

，说是马血清可封闭牛血清刺激PC12分化的位点，究竟位点在哪？是否和NGF刺激位点一致，尚不清楚。不过按5%HS，10%FBS培养应该没错。 丁香园monde的观点： 我养这个细胞一年多了，有点经验和大家交流一下。 1.我用的是15％的马血清和2.5%的胎牛，胎牛要用进口的，国产的容易分化。 2.关于表面处理的问题，值得注意的是胶原和多聚赖氨酸使细胞贴壁的原理不太一样。多聚就是纯粹的物理黏附作用，而胶原则是刺激的细胞，使细胞的表达一些能有助于贴壁的蛋白，这种刺激作用还涉及到MAPK途径