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- 2025年07月05日
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- 技术资料
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28
- 英文名：
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy3
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
详见说明书
- 规格：
瓶
公司产品仅供科研产品名称：PE-Cy3标记的兔抗牛IgG
英文名称：Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy3
应用: Flow-Cyt=1:100-1000;IF=1:100-1000;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 2mg/1ml
蛋白分子量: 150kDa
纯化方法: affinity purified by Protein A
| 产品名称 | PE-Cy3标记的兔抗牛IgG |
| 英文名称 | Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy3 |
| 货号 | BH-DB8665 |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL～1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL～0.5 mL |
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
以下是PE-Cy3标记的兔抗牛IgG的相关产品：
3,3'-Sulfonyldianiline 599-61-1 中文名：3,3'-二氨基二苯砜 分子式：C12H12N2O2S 谷胱甘肽过氧化物酶 英文名称： glathione peroxidase 英文缩写： GSH-Px
1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene 3073-87-8 中文名：1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基恶唑基)]苯 分子式：C26H20N2O2 谷胱甘肽过氧化物酶 英文名称：
人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit Capecitabine 中文名：卡培他滨 分子式：C15H22FN3O6
人可溶性P选择素(sP-selectin)ELISAKit Tigecycline 分子式：C29H39N5O8
人抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISAKit Tigogenin 77-60-1 中文名：剑麻皂素 分子式：C27H44O3 度：98.0% 关键词： 毛地黄属; 万年兰属; 螺甾烷
大鼠P27蛋白(P27)ELISA试剂盒 ，英文名： P27 ELISA Kit
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PE-Cy3标记的兔抗牛IgG兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
People leils binding type AFP / AFP Varia 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒E
Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISAKit 人免疫球蛋白重链(IgH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISA试剂盒人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
组织PAK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
humanperoxisomeproliferativeactivatedreceptorgamacoactivator1alpha,PPARGC1ELISAKit人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARGC1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
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文献和实验FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如，在实验设计时，选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗，相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时，由于两种一抗种属来源不同，可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗，滴加二抗时，先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育，洗涤后，滴加SABC-Cy3
胶体金与兔抗牛IgG用量比例的确定 每ml胶体金所需的最低稳定蛋白量是30µg，根据试剂用量增加20％，所以每ml胶体金所需的最低稳定兔抗牛IgG量为36µg。3．金标记兔抗牛IgG的制备 取所需量的兔抗牛IgG，加入少许去离子水，用0.1Mol/L K2CO3溶液调pH值为9.0（用精密pH试纸测定），同时胶体金溶液的pH值也调至9.0。在磁力搅拌下，将20ml胶体金溶液加入至兔抗牛IgG中，继续搅拌10min，加入3.5ml 3％的聚乙二醇（分子量20 000）作为稳定剂，以使其最终浓度达到
胶体金与兔抗牛IgG用量比例的确定 每ml胶体金所需的最低稳定蛋白量是30µg，根据 试剂 用量增加20％，所以每ml胶体金所需的最低稳定兔抗牛IgG量为36µg。 3．金标记兔抗牛IgG的制备 取所需量的兔抗牛IgG，加入少许去离子水，用0.1Mol/L K 2 CO 3 溶液调pH值为9.0（用精密pH试纸测定），同时胶体金溶液的pH值也调至
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