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研究应用｜使用 NanoBiT 技术进行的蛋白质相互作用细胞内定位成像

和 NLS-FKBP/RRB NanoBiT 的细胞内定位 实验条件： 显微镜：IXplore Live for Luminescence 显微镜系统 相机：imagEM EM-CCD 相机 (Hamamatsu Photonics) 物镜：LUCPLFLN60XPH 成像透镜：0.35X EM 增益：1200 呋喃嗪浓度：1/200 稀释 西罗莫司最终浓度：30 nM 曝光时间：相衬 50 ms/生物发光 3 min/荧光 100 ms 图 4 显示了西罗莫司刺激前后的 NLS-FKBP

肿瘤发生新机制！Nature 子刊发文：lncRNA 通过结合核糖体相关蛋白参与神经母细胞瘤的发生机制

及质谱分析，发现 lncNB1 的 RNA 可以特异结合到核糖体蛋白 L35（RPL35）。体外实验也证实，只有敲除 RPL35 才能显著下调 DEPDC1B、N-Myc 和 E2F1 蛋白的表达（下图 a）。图片来源：Nature Communications接下来，研究人员探究了 lncNB1、DEPDC1B、RPL35 或 E2F1 在神经母细胞瘤细胞增殖或存活中的作用。通过敲减上述基因，发现活细胞数量显著下降（下图 a/c），另外流式细胞术检测 Annexin V 阳性染色细胞显示，敲除

技术原理与方法｜将硅油物镜配合共聚焦激光扫描显微镜用于透明化标本的深层组织观察

图像比较。 荧光抗体染色：VGluT1（绿色）/ VGluT2（红色）/ MAP2（蓝色） 使用常规油浸物镜和硅油物镜拍摄的小鼠新皮层 XY 图像。当使用两组物镜获得明亮荧光图像时，在使用硅油物镜成像时，深度为 35μm 的 XY 图像明显更亮并且具有更高的分辨率。 在 35μm 处拍摄图像之间的亮度差异是由于油浸透镜球差所致，其原因是物镜所使用的油种类（ne≤1.52）和透明化溶液 SCALEVIEW-A2（ne≤1.38）之间折射率差引起的。 由于硅油的折射率（ne≒1.40）更接近