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40
- 英文名:
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
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详见说明书
- 规格:
瓶
英文名称:Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647
应用: Flow-Cyt=1:100-1000;IF=1:100-1000;not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
浓度: 2mg/1ml
蛋白分子量: 150kDa
| 产品名称 | Alexa Fluor 647标记的羊抗兔IgG |
| 英文名称 | Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 |
| 货号 | BH-DB7898 |
操作步骤:
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂, 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10mL/150mm培养板的冷PBS,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂, 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
| 细胞数量 | Lysis Buffer加入量 |
| 107个 | 0.5 mL~1 mL |
| 5×106个 | 0.2 mL~0.5 mL |
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
以下是Alexa Fluor 647标记的羊抗兔IgG的相关产品:
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英文名称Ratgp130ELISAKIT大鼠gp130规格:96T/48T
抗体/蛋白AP标记制备试剂盒3次
ELISAKitPGE2人前列腺素E2规格:48T/96T
固定液的应用:
1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以pH7 2~7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:zui常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效
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文献和实验技术原理与方法|超级色差校正物镜 PLAPON60XOSC 在脑组织四重免疫荧光分析中的应用
种类型的荧光抗体在单个标本中准确展示荧光标记分子的共定位情况。 PLAPON60XOSC 和 UPLSAPO60XO 的性能比较 2. 超级色差校正物镜的应用-脑组织的四重免疫荧光 图 1. 脑组织的四重免疫荧光。 VIAAT 染色(Alexa Fluor405,蓝色);CB1 染色(Alexa Fluor488,绿色);VGluT3 染色(Cy3,红色);DGLα染色(Alexa Fluor647,白色)。 大麻素合成酶 DGLα(白色)和大麻素受体 CB1(绿色)聚集在小鼠
保持优异的水溶性,为该波段最亮的橙色荧光染料。例如:同等的标记程度下,CF543 标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用Alexa Fluor 546 标记的2~10倍。CF 555、AlexaFluor 555、Tetramethylrhodamine(TAMRA) 等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料;红色(568-594nm处激发)CF 568、Alexa Fluor® 568,ATTO 565, Rhodamine Red等568nm处红色荧光染料;CF 568染料耐光性最好;高效水溶
,耐光,水溶性好,确保了CF 543染料与抗体的耦联物保持优异的水溶性,为该波段最亮的橙色荧光染料。例如:同等的标记程度下,CF 543标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用Alexa Fluor 546 标记的2~10倍。 CF 555、Alexa Fluor 555、Tetramethylrhodamine (TAMRA) 等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料。 4、红色(568-594nm处激发) CF 568、Alexa Fluor® 568, ATTO 565
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