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- 2025年08月28日
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深圳子科生物
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500ml
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文献和实验一、所需试剂 1. 2%丽春红S浓贮存液（3-羟基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2，7-萘二磺酸）：溶于30%三氯醋酸和30%磺基水杨酸中。贮存液可在室温下稳定存放1年以上。 2. PBS。 二、操作步骤 1. 在染色之前，先配制丽春红S的应用液。即将2%的丽春红S浓贮存液用1%醋酸1:10稀释即成为应用液（注意：如果使用硝酸纤维膜，须将丽春红S应用液更换为用水1:10稀释）； 2. 用丽春红S应用液将PVDF膜洗1次； 3. 加入新鲜稀释的丽春红S应用
酸纤维素薄膜膜面向下放入电泳槽中的缓冲液纱布上，加样端放在负极，静置2分钟后开启电源，调电压200伏，电泳40分钟。 5. 电泳结束后，关掉电源，观察电泳图谱，并记录红色区带（几条）及分布（位置）情况。 6. 染色： 将醋酸纤维素薄膜放入染色液中2分钟，然后转入漂洗液中洗至背底呈白色，再观察结果。 电泳对比图谱 含异常血红蛋白的样品：应在未染色前观察，除正常成分外，在任何位置出现的不经
转印后切取印迹膜 有时转印后需将印迹剪成较小的片状进行单独处理。单个泳道可以泳动同一样品，待彼此分开后，可用不同的抗体并列检测。如以电泳方向剪膜，就可在同一样品中检测不同分子大小的抗原。为了简便而精确地找到泳道，电泳之后用丽春红S（Ponceaus S）或印度墨汁对印迹膜进行染色，便可很快确定待测蛋白质的位置并将其剪下。表表明两种染料的的适用范围及优缺点，用丽春红S染色的优点是操作简便，价廉和具有可逆性，在封闭过程中，染色易消褪，且不干扰进一步的检测
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