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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 库存:
50
- 供应商:
深圳子科生物
- 规格:
500ml
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文献和实验1、试剂耗材的准备:(1)转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl,39 mM 甘氨酸,0.037% SDS,20%甲醇):(2)10 × 丽春红染液:(3)TBS 缓冲液:(4)TBST 缓冲液(含20%Tween20 的TBS 缓冲液):(5)封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液):(6)一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或TBST 进行稀释。(7)底物显色液ECL,4℃ 避光保存,现用现配。(8)显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中,可多次使用。室温避光存放
使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液(含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS
。 1)高压热修复 切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0,工作液)或0.001M EDTA(pH8.0)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接免疫组化染色步骤。 2)煮沸热修复 切片脱蜡至水后,放入盛有 0.01M 枸橼酸钠缓冲溶液(pH
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