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- 详细信息
- 文献和实验
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4℃,避光,6个月
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50
- 供应商:
深圳子科生物
- 规格:
100ml
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
鉴定。 二、TEM 鉴定外泌体外观: 将提取的外泌体样本置于冰盒中,使用移液枪吸取外泌体样本于铜网上静置 1 min。(用镊子夹铜网要轻,防止铜网夹破)。再将铜网上的外泌体样本吸干,使用移液枪吸取醋酸双氧铀染色液室温染色。随后将染色完成的样本放于灯下烤。样本制好后,观察拍照,保存图片。结果如下: 图一 TEM 鉴定脑组织外泌体形态 从 TEM 结果中可以看出,样本中有典型的外泌体结构,且数量比较多,大小不一。 三、NTA 鉴定外泌体的大小和颗粒浓度
,这次实验我们控制在75V,走过浓缩胶后电压调为120V。电泳时观察凝胶板上的样品溴酚蓝的色条带走至近底端1cm时,停止电泳。关闭电源。然后从电泳槽内小心取出凝胶板。 6) 染色 a) 用刀片或薄板将凝胶板外的两块玻璃板轻轻撬开,使凝胶倾伏在其中一块玻璃板上。 b) 用刀片在凝胶上沿分离胶与浓缩胶的交接处,将分离胶切下,并在分离胶的左上角切掉一小角,以标记样品顺序。 c)然后将分离胶小心移入染色器皿中。 d)在染色器皿中加入100ml染色液,加盖,染色3小时。 7)脱色 将染色液倒
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