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- 2025年10月24日
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深圳子科生物
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100ml
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文献和实验蛋白质显色反应之一，即在蛋白质的碱性水溶液中加数滴稀硫酸铜溶液，则显紫蓝～紫红色。除二肽外，肽也会产生同样的反应。由于双缩脲（NH2－CONHCONH2）也显示同样的反应，故以此命名。也可用于蛋白质的定量测定，但灵敏度低。为了克服这缺点，可以和O.Folin的酚试剂反应结合起来使用。
（一）实验原理 双缩脲（NH3CONHCONH3）是两 个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1~10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨
一、原理 蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲反应并非蛋白质特有的颜色反应，分子中含二个以上肽键者有此反应。 二、双缩脲 试剂 未失结晶水的硫酸铜（CuSO 4· 5H 2 O）3.0g溶于500ml新鲜制备的 蒸馏 水或刚煮沸冷却的去离子水中，加酒石酸钾钠（NaKC
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